ELSIA操作步驟復(fù)雜，影響反應(yīng)因素較多，PM-Scl/PM-1 Elisa kit特別是固相載體的包被難達(dá)到各個(gè)體之間的*，因此在定量測(cè)定中，每批測(cè)試均須用一系列不同濃度的參考標(biāo)準(zhǔn)品在相同的條件下制作標(biāo)準(zhǔn)曲線。測(cè)定大分子量物質(zhì)的夾心法ELISA，標(biāo)準(zhǔn)曲線的范圍一般較寬，曲線zui高點(diǎn)的吸光度可接近2.0，繪制時(shí)常用半對(duì)數(shù)紙，以檢測(cè)物的濃度為橫坐標(biāo)，以吸光度為縱坐標(biāo)，將各濃度的值逐點(diǎn)連接，所得曲線一般呈S形，其頭、尾部曲線趨于平坦，PM-Scl/PM-1 Elisa kit中央較呈直線的部分是的檢測(cè)區(qū)域。

PM-Scl/PM-1 Elisa kit技術(shù)操作要點(diǎn)：

1. 標(biāo)本的采取和保存。
2. 試劑的準(zhǔn)備
3. 加樣。
4. 保溫。
5. 洗滌。
6. 顯色和比色。
7. 酶標(biāo)比色儀。
8. 結(jié)果判斷。

將抗原或抗體固定在過程稱為包被(coating)。換言之，包被即是抗原或抗體結(jié)合到固相載體表面的過程。PM-Scl/PM-1 Elisa kit蛋白質(zhì)與聚苯乙烯固相載體是通過物理吸附結(jié)合的，靠的是蛋白質(zhì)分子結(jié)構(gòu)上的疏水基團(tuán)與固相載體表面的疏水基團(tuán)間的作用于。這種物理吸附是非特異性的，受蛋白質(zhì)的分子量、等電點(diǎn)、濃度等的影響。載體對(duì)不同蛋白質(zhì)的吸附能力是不相同的，大分子蛋白質(zhì)較小分子蛋白質(zhì)通常含有更多的疏水基團(tuán)，故更易吸附到固相載體表面。IgG對(duì)聚苯乙烯等固相具有較強(qiáng)的吸附力，其聯(lián)結(jié)多發(fā)生在Fc段上，抗體結(jié)合點(diǎn)暴露于外，因此抗體的包被一般均采用直接吸附法。蛋白質(zhì)抗原大多也可采用與抗體相似的方法包被。當(dāng)抗原決定簇存在于或鄰近于疏水區(qū)域時(shí)，抗原與固相載體的直接吸附可使抗原決定簇不能充分暴露，在這種情況下，PM-Scl/PM-1 Elisa kit直接包被效果不佳，可以采用間接的捕獲包被法，即先將針對(duì)該抗原的特異抗體作預(yù)包被，其后通過抗原抗體反應(yīng)使抗原固相化。此間接結(jié)合在固相上的抗原遠(yuǎn)離載體表面，其抗原決定簇也得以充分暴露。間接包被的抗原經(jīng)固相抗體的親和層析作用，包被在固相上的抗原純度大大提高，因此含雜質(zhì)較多的抗原也可采用捕獲包被法，試驗(yàn)的特異性、敏感性均由此得以改善，重復(fù)性亦佳。間接包被的另一優(yōu)點(diǎn)是抗原用量少，僅為直接包被的1/10乃至于/100。不易吸附在聚苯乙烯載體上的非蛋白質(zhì)抗原可采用特殊的包被方式。例如，在檢測(cè)抗DNA抗體時(shí)，需用DNA作為包被抗原，而普遍的固相載體一般不能直接與核酸結(jié)合?？蓪⒕郾揭蚁┌逑冉?jīng)紫外線照射（例如30W紫外燈，75cm照射12小時(shí)），以增加其吸附性能。固相載體先用堿性蛋白質(zhì)，如聚賴氨酸、*等作預(yù)包被，也可提高核酸的結(jié)合力。也可用親和素*系統(tǒng)作間接包被，PM-Scl/PM-1 Elisa kit即用親和素先包被載體，然后加入*化的DNA，這種包被方法均勻、牢固，已擴(kuò)大應(yīng)用于各種抗原物質(zhì)的定量測(cè)定。

脂類物質(zhì)無法與固相載體結(jié)合，可將其在有機(jī)溶劑（例如乙醇）中溶解后加入ELISA板孔中，開蓋置冰箱過夜或冷風(fēng)吹干，待酒精揮發(fā)后，讓脂質(zhì)自然干固在固相表面?？剐牧字贵w的ELISA試劑一般采用這種包被方式。

PM-Scl/PM-1 Elisa kit相關(guān)產(chǎn)品*：xyD232Hu    人心肌肌鈣蛋白T(TNNT2)檢測(cè)試劑盒    ELISA Kit for Troponin T Type 2, Cardiac (TNNT2)     檢測(cè)范圍：9.375-1000pg/ml    
xyE563Hu    人TATA框結(jié)合蛋白關(guān)聯(lián)因子13(TAF13)檢測(cè)試劑盒    ELISA Kit for TATA Box Binding Protein Associated Factor 13 (TAF13)     檢測(cè)范圍：9.375-1000pg/ml    
xyF667Hu    人核轉(zhuǎn)錄因子Y亞基γ(NFYC)檢測(cè)試劑盒    ELISA Kit for Nuclear Transcription Factor Y Gamma (NFYC)     檢測(cè)范圍：9.375-1000pg/ml    
xyL105Hu    人細(xì)胞程序性死亡蛋白5(PDCD5)檢測(cè)試劑盒    ELISA Kit for Programmed HZll Death Protein 5 (PDCD5)     檢測(cè)范圍：9.375-1000pg/ml    
xyC152Hu    人Ⅴ型膠原α2(COL5α2)檢測(cè)試劑盒    ELISA Kit for Collagen Type V Alpha 2 (COL5a2)     檢測(cè)范圍：9.375-1000pg/ml    
xyP552Hu    人無翅型MMTV整合位點(diǎn)家族成員11(WNT11)檢測(cè)試劑盒    ELISA Kit for Wingless Type MMTV Integration Site Family, Member 11 (WNT11)     檢測(cè)范圍：9.375-1000pg/ml    
xyS272Hu    人Notch2氨基端樣蛋白(NOTCH2NL)檢測(cè)試劑盒    ELISA Kit for Notch2 N-Terminal Like Protein (NOTCH2NL)     檢測(cè)范圍：9.375-1000pg/ml    
xyD977Hu    人腎上腺素能受體α2C(ADRα2C)檢測(cè)試劑盒    ELISA Kit for Adrenergic ReHZptor Alpha 2C (ADRa2C)     檢測(cè)范圍：9.375-1000pg/ml    
xyD747Hu    人低密度脂蛋白受體相關(guān)蛋白4(LRP4)檢測(cè)試劑盒    ELISA Kit for Low Density Lipoprotein ReHZptor Related Protein 4 (LRP4)     檢測(cè)范圍：9.375-1000pg/ml    
xyE803Hu    人AMPA離子能*受體3(GRIA3)檢測(cè)試劑盒    ELISA Kit for Glutamate ReHZptor, Ionotropic, AMPA 3 (GRIA3)     檢測(cè)范圍：9.375-1000pg/ml    
xyE359Hu    人鈉鉀氯協(xié)同轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白2(NKCC2)檢測(cè)試劑盒    ELISA Kit for Na-K-Cl Cotransporter 2 (NKCC2)     檢測(cè)范圍：9.375-1000pg/ml    
xyE361Hu    人鈉氯協(xié)同轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白(NCCT)檢測(cè)試劑盒    ELISA Kit for Na-Cl Cotransporter (NCCT)     檢測(cè)范圍：9.375-1000pg/ml    
xyN021Hu    人RNA結(jié)合基元蛋白20(RBM20)檢測(cè)試劑盒    ELISA Kit for RNA Binding Motif Protein 20 (RBM20)     檢測(cè)范圍：9.375-1000pg/ml    
xyQ971Hu    人RNA結(jié)合基元蛋白24(RBM24)檢測(cè)試劑盒    ELISA Kit for RNA Binding Motif Protein 24 (RBM24)     檢測(cè)范圍：9.375-1000pg/ml    
xyB550Hu    人脊髓灰質(zhì)炎病毒受體(PVR)檢測(cè)試劑盒    ELISA Kit for Poliovirus ReHZptor (PVR)     檢測(cè)范圍：9.375-1000pg/ml    
xyG647Hu    人RNA結(jié)合基元蛋白38(RBM38)檢測(cè)試劑盒    ELISA Kit for RNA Binding Motif Protein 38 (RBM38)     檢測(cè)范圍：9.375-1000pg/ml    
xyC239Hu    人甲狀腺素受體α(THRα)檢測(cè)試劑盒    ELISA Kit for Thyroid Hormone ReHZptor Alpha (THRa)     檢測(cè)范圍：9.375-1000pg/ml    
xyG436Hu    人橋粒芯膠粘蛋白2(DSC2)檢測(cè)試劑盒    ELISA Kit for Desmocollin 2 (DSC2)     檢測(cè)范圍：9.375-1000pg/ml    
xyC499Hu    人間隙連接蛋白β1(GJβ1)檢測(cè)試劑盒    ELISA Kit for Gap Junction Protein Beta 1 (GJb1)     檢測(cè)范圍：9.375-1000pg/ml