ELSIA操作步驟復(fù)雜，影響反應(yīng)因素較多，PLN Elisa kit特別是固相載體的包被難達(dá)到各個體之間的*，因此在定量測定中，每批測試均須用一系列不同濃度的參考標(biāo)準(zhǔn)品在相同的條件下制作標(biāo)準(zhǔn)曲線。測定大分子量物質(zhì)的夾心法ELISA，標(biāo)準(zhǔn)曲線的范圍一般較寬，曲線zui高點的吸光度可接近2.0，繪制時常用半對數(shù)紙，以檢測物的濃度為橫坐標(biāo)，以吸光度為縱坐標(biāo)，將各濃度的值逐點連接，所得曲線一般呈S形，其頭、尾部曲線趨于平坦，PLN Elisa kit中央較呈直線的部分是的檢測區(qū)域。

PLN Elisa kit技術(shù)操作要點：

1. 標(biāo)本的采取和保存。
2. 試劑的準(zhǔn)備
3. 加樣。
4. 保溫。
5. 洗滌。
6. 顯色和比色。
7. 酶標(biāo)比色儀。
8. 結(jié)果判斷。

將抗原或抗體固定在過程稱為包被(coating)。換言之，包被即是抗原或抗體結(jié)合到固相載體表面的過程。PLN Elisa kit蛋白質(zhì)與聚苯乙烯固相載體是通過物理吸附結(jié)合的，靠的是蛋白質(zhì)分子結(jié)構(gòu)上的疏水基團與固相載體表面的疏水基團間的作用于。這種物理吸附是非特異性的，受蛋白質(zhì)的分子量、等電點、濃度等的影響。載體對不同蛋白質(zhì)的吸附能力是不相同的，大分子蛋白質(zhì)較小分子蛋白質(zhì)通常含有更多的疏水基團，故更易吸附到固相載體表面。IgG對聚苯乙烯等固相具有較強的吸附力，其聯(lián)結(jié)多發(fā)生在Fc段上，抗體結(jié)合點暴露于外，因此抗體的包被一般均采用直接吸附法。蛋白質(zhì)抗原大多也可采用與抗體相似的方法包被。當(dāng)抗原決定簇存在于或鄰近于疏水區(qū)域時，抗原與固相載體的直接吸附可使抗原決定簇不能充分暴露，在這種情況下，PLN Elisa kit直接包被效果不佳，可以采用間接的捕獲包被法，即先將針對該抗原的特異抗體作預(yù)包被，其后通過抗原抗體反應(yīng)使抗原固相化。此間接結(jié)合在固相上的抗原遠(yuǎn)離載體表面，其抗原決定簇也得以充分暴露。間接包被的抗原經(jīng)固相抗體的親和層析作用，包被在固相上的抗原純度大大提高，因此含雜質(zhì)較多的抗原也可采用捕獲包被法，試驗的特異性、敏感性均由此得以改善，重復(fù)性亦佳。間接包被的另一優(yōu)點是抗原用量少，僅為直接包被的1/10乃至于/100。不易吸附在聚苯乙烯載體上的非蛋白質(zhì)抗原可采用特殊的包被方式。例如，在檢測抗DNA抗體時，需用DNA作為包被抗原，而普遍的固相載體一般不能直接與核酸結(jié)合?？蓪⒕郾揭蚁┌逑冉?jīng)紫外線照射（例如30W紫外燈，75cm照射12小時），以增加其吸附性能。固相載體先用堿性蛋白質(zhì)，如聚賴氨酸、*等作預(yù)包被，也可提高核酸的結(jié)合力。也可用親和素*系統(tǒng)作間接包被，PLN Elisa kit即用親和素先包被載體，然后加入*化的DNA，這種包被方法均勻、牢固，已擴大應(yīng)用于各種抗原物質(zhì)的定量測定。

脂類物質(zhì)無法與固相載體結(jié)合，可將其在有機溶劑（例如乙醇）中溶解后加入ELISA板孔中，開蓋置冰箱過夜或冷風(fēng)吹干，待酒精揮發(fā)后，讓脂質(zhì)自然干固在固相表面?？剐牧字贵w的ELISA試劑一般采用這種包被方式。

PLN Elisa kit相關(guān)產(chǎn)品*：xyD144Hu    人煙堿型*受體β3(CHRNβ3)檢測試劑盒    ELISA Kit for Cholinergic ReHZptor, Nicotinic, Beta 3 (CHRNb3)     檢測范圍：9.375-1000pg/ml    
xyG006Hu    人腺苷A2a受體(ADORA2a)檢測試劑盒    ELISA Kit for Adenosine A2a ReHZptor (ADORA2a)     檢測范圍：9.375-1000pg/ml    
xyH620Hu    人甘露糖磷酸異構(gòu)酶(MPI)檢測試劑盒    ELISA Kit for Mannose Phosphate Isomerase (MPI)     檢測范圍：9.375-1000pg/ml    
xyC601Hu    人含纈酪肽蛋白(VCP)檢測試劑盒    ELISA Kit for Valosin Containing Protein (VCP)     檢測范圍：9.375-1000pg/ml    
xyF817Hu    人跨膜*蛋白酶6(TMPRSS6)檢測試劑盒    ELISA Kit for Transmembrane Protease, Serine 6 (TMPRSS6)     檢測范圍：9.375-1000pg/ml    
xyL942Hu    人活化T-細(xì)胞核因子2(NFATC2)檢測試劑盒    ELISA Kit for Nuclear Factor Of Activated T-HZlls, Cytoplasmic 2 (NFATC2)     檢測范圍：9.375-1000pg/ml    
xyM366Hu    人TERF1相互作用核因子2(TINF2)檢測試劑盒    ELISA Kit for TERF1 Interacting Nuclear Factor 2 (TINF2)     檢測范圍：9.375-1000pg/ml    
xyN281Hu    人內(nèi)β-N-乙?；被咸烟擒彰?ENGASE)檢測試劑盒    ELISA Kit for Endo Beta-N-AHZtylglucosaminidase (ENGASE)     檢測范圍：9.375-1000pg/ml    
xyN433Hu    人孕酮免疫調(diào)節(jié)結(jié)合因子1(PIBF1)檢測試劑盒    ELISA Kit for Progesterone Immunomodulatory Binding Factor 1 (PIBF1)     檢測范圍：9.375-1000pg/ml    
xyV001Hu    人11-β-羥基類固醇脫氫酶3(HSD11β3)檢測試劑盒    ELISA Kit for 11-Beta-Hydroxysteroid Dehydrogenase Type 3 (HSD11b3)     檢測范圍：9.375-1000pg/ml    
xyH266Hu    人腎腫瘤抗原(RAGE)檢測試劑盒    ELISA Kit for Renal Tumor Antigen (RAGE)     檢測范圍：9.375-1000pg/ml    
xyB132Hu    人趨化因子C-C-基元配體1(CCL1)檢測試劑盒    ELISA Kit for Chemokine C-C-Motif Ligand 1 (CCL1)     檢測范圍：9.375-1000pg/ml    
xyB499Hu    人腫瘤壞死因子受體超家族成員1A(TNFRSF1A)檢測試劑盒    ELISA Kit for Tumor Necrosis Factor ReHZptor Superfamily, Member 1A (TNFRSF1A)     檢測范圍：9.375-1000pg/ml    
xyC091Hu    人巨噬細(xì)胞炎性蛋白4α(MIP4α)檢測試劑盒    ELISA Kit for Macrophage Inflammatory Protein 4 Alpha (MIP4a)     檢測范圍：9.375-1000pg/ml    
xyD076Hu    人碳酸酐酶Ⅸ(CA9)檢測試劑盒    ELISA Kit for Carbonic Anhydrase IX (CA9)     檢測范圍：9.375-1000pg/ml    
xyC945Hu    人褪黑素受體1A(MTNR1A)檢測試劑盒    ELISA Kit for Melatonin ReHZptor 1A (MTNR1A)     檢測范圍：9.375-1000pg/ml    
xyB334Hu    人β-1,3-葡糖醛酸基移酶1(β3GAT1)檢測試劑盒    ELISA Kit for Beta-1,3-Glucuronyltransferase 1 (b3GAT1)     檢測范圍：9.375-1000pg/ml    
xyC788Hu    人端粒重復(fù)結(jié)合因子1(TERF1)檢測試劑盒    ELISA Kit for omeric Repeat Binding Factor 1 (TERF1)     檢測范圍：9.375-1000pg/ml