ELSIA操作步驟復(fù)雜，影響反應(yīng)因素較多，PLGF Elisa kit特別是固相載體的包被難達(dá)到各個體之間的*，因此在定量測定中，每批測試均須用一系列不同濃度的參考標(biāo)準(zhǔn)品在相同的條件下制作標(biāo)準(zhǔn)曲線。測定大分子量物質(zhì)的夾心法ELISA，標(biāo)準(zhǔn)曲線的范圍一般較寬，曲線zui高點的吸光度可接近2.0，繪制時常用半對數(shù)紙，以檢測物的濃度為橫坐標(biāo)，以吸光度為縱坐標(biāo)，將各濃度的值逐點連接，所得曲線一般呈S形，其頭、尾部曲線趨于平坦，PLGF Elisa kit中央較呈直線的部分是的檢測區(qū)域。

PLGF Elisa kit技術(shù)操作要點：

1. 標(biāo)本的采取和保存。
2. 試劑的準(zhǔn)備
3. 加樣。
4. 保溫。
5. 洗滌。
6. 顯色和比色。
7. 酶標(biāo)比色儀。
8. 結(jié)果判斷。

將抗原或抗體固定在過程稱為包被(coating)。換言之，包被即是抗原或抗體結(jié)合到固相載體表面的過程。PLGF Elisa kit蛋白質(zhì)與聚苯乙烯固相載體是通過物理吸附結(jié)合的，靠的是蛋白質(zhì)分子結(jié)構(gòu)上的疏水基團與固相載體表面的疏水基團間的作用于。這種物理吸附是非特異性的，受蛋白質(zhì)的分子量、等電點、濃度等的影響。載體對不同蛋白質(zhì)的吸附能力是不相同的，大分子蛋白質(zhì)較小分子蛋白質(zhì)通常含有更多的疏水基團，故更易吸附到固相載體表面。IgG對聚苯乙烯等固相具有較強的吸附力，其聯(lián)結(jié)多發(fā)生在Fc段上，抗體結(jié)合點暴露于外，因此抗體的包被一般均采用直接吸附法。蛋白質(zhì)抗原大多也可采用與抗體相似的方法包被。當(dāng)抗原決定簇存在于或鄰近于疏水區(qū)域時，抗原與固相載體的直接吸附可使抗原決定簇不能充分暴露，在這種情況下，PLGF Elisa kit直接包被效果不佳，可以采用間接的捕獲包被法，即先將針對該抗原的特異抗體作預(yù)包被，其后通過抗原抗體反應(yīng)使抗原固相化。此間接結(jié)合在固相上的抗原遠(yuǎn)離載體表面，其抗原決定簇也得以充分暴露。間接包被的抗原經(jīng)固相抗體的親和層析作用，包被在固相上的抗原純度大大提高，因此含雜質(zhì)較多的抗原也可采用捕獲包被法，試驗的特異性、敏感性均由此得以改善，重復(fù)性亦佳。間接包被的另一優(yōu)點是抗原用量少，僅為直接包被的1/10乃至于/100。不易吸附在聚苯乙烯載體上的非蛋白質(zhì)抗原可采用特殊的包被方式。例如，在檢測抗DNA抗體時，需用DNA作為包被抗原，而普遍的固相載體一般不能直接與核酸結(jié)合。可將聚苯乙烯板先經(jīng)紫外線照射（例如30W紫外燈，75cm照射12小時），以增加其吸附性能。固相載體先用堿性蛋白質(zhì)，如聚賴氨酸、*等作預(yù)包被，也可提高核酸的結(jié)合力。也可用親和素*系統(tǒng)作間接包被，PLGF Elisa kit即用親和素先包被載體，然后加入*化的DNA，這種包被方法均勻、牢固，已擴大應(yīng)用于各種抗原物質(zhì)的定量測定。

脂類物質(zhì)無法與固相載體結(jié)合，可將其在有機溶劑（例如乙醇）中溶解后加入ELISA板孔中，開蓋置冰箱過夜或冷風(fēng)吹干，待酒精揮發(fā)后，讓脂質(zhì)自然干固在固相表面?？剐牧字贵w的ELISA試劑一般采用這種包被方式。

PLGF Elisa kit相關(guān)產(chǎn)品*：xyP862Hu    人粘蛋白12(MUC12)檢測試劑盒    ELISA Kit for Mucin 12, HZll SurfaHZ Associated (MUC12)     檢測范圍：9.375-1000pg/ml    
xyQ641Hu    人棘皮動物微管關(guān)聯(lián)蛋白樣蛋白2(EML2)檢測試劑盒    ELISA Kit for Echinoderm Microtubule Associated Protein Like Protein 2 (EML2)     檢測范圍：9.375-1000pg/ml    
xyQ741Hu    人胎盤特異性蛋白9(PLAC9)檢測試劑盒    ELISA Kit for PlaHZnta Specific Protein 9 (PLAC9)     檢測范圍：9.375-1000pg/ml    
xyT372Hu    人短腭肺鼻腔上皮癌關(guān)聯(lián)蛋白2(SPLUNC2)檢測試劑盒    ELISA Kit for Short Palate, Lung And Nasal Epithelium Carcinoma Associated Protein 2 (SPLUNC2)     檢測范圍：9.375-1000pg/ml    
xyT373Hu    人短腭肺鼻腔上皮癌關(guān)聯(lián)蛋白3(SPLUNC3)檢測試劑盒    ELISA Kit for Short Palate, Lung And Nasal Epithelium Carcinoma Associated Protein 3 (SPLUNC3)     檢測范圍：9.375-1000pg/ml    
xyA596Hu    人銅伴侶超氧化物歧化酶(SOD4)檢測試劑盒    ELISA Kit for Superoxide Dismutase, Copper Chaperone (SOD4)     檢測范圍：9.375-1000pg/ml    
xyA751Hu    人細(xì)胞程序性死亡蛋白1(PDCD1)檢測試劑盒    ELISA Kit for Programmed HZll Death Protein 1 (PDCD1)     檢測范圍：9.375-1000pg/ml    
xyA755Hu    人肌球蛋白重鏈2(MYH2)檢測試劑盒    ELISA Kit for Myosin Heavy Chain 2, Skeletal Muscle, Adult (MYH2)     檢測范圍：9.375-1000pg/ml    
xyD321Hu    人20S-蛋白酶體(20S-PSM)檢測試劑盒    ELISA Kit for 20S-Proteasome (20S-PSM)     檢測范圍：9.375-1000pg/ml    
xyD329Hu    人蛋白酶體亞基α1(PSMα1)檢測試劑盒    ELISA Kit for Proteasome Subunit Alpha Type 1 (PSMa1)     檢測范圍：9.375-1000pg/ml    
xyD416Hu    人肌球蛋白重鏈4(MYH4)檢測試劑盒    ELISA Kit for Myosin Heavy Chain 4, Skeletal Muscle (MYH4)     檢測范圍：9.375-1000pg/ml    
xyD418Hu    人肌球蛋白重鏈7(MYH7)檢測試劑盒    ELISA Kit for Myosin Heavy Chain 7, Cardiac Muscle, Beta (MYH7)     檢測范圍：9.375-1000pg/ml    
xyD419Hu    人肌球蛋白重鏈6(MYH6)檢測試劑盒    ELISA Kit for Myosin Heavy Chain 6, Cardiac Muscle, Alpha (MYH6)     檢測范圍：9.375-1000pg/ml    
xyD486Hu    人5-羥色胺受體2A(HTR2A)檢測試劑盒    ELISA Kit for 5-Hydroxytryptamine ReHZptor 2A (HTR2A)     檢測范圍：9.375-1000pg/ml    
xyD934Hu    人腫瘤壞死因子配體超家族成員9(TNFSF9)檢測試劑盒    ELISA Kit for Tumor Necrosis Factor Ligand Superfamily, Member 9 (TNFSF9)     檢測范圍：9.375-1000pg/ml    
xyD964Hu    人核受體相關(guān)蛋白1(NURR1)檢測試劑盒    ELISA Kit for Nuclear ReHZptor Related Protein 1 (NURR1)     檢測范圍：9.375-1000pg/ml    
xyE478Hu    人睪丸陰離子轉(zhuǎn)運蛋白1(TAT1)檢測試劑盒    ELISA Kit for Testis Anion Transporter 1 (TAT1)     檢測范圍：9.375-1000pg/ml    
xyE801Hu    人AMPA離子能*受體1(GRIA1)檢測試劑盒    ELISA Kit for Glutamate ReHZptor, Ionotropic, AMPA 1 (GRIA1)     檢測范圍：9.375-1000pg/ml    
xyE802Hu    人AMPA離子能*受體2(GRIA2)檢測試劑盒    ELISA Kit for Glutamate ReHZptor, Ionotropic, AMPA 2 (GRIA2)     檢測范圍：9.375-1000pg/ml