ELSIA操作步驟復(fù)雜，影響反應(yīng)因素較多，PGA Elisa kit特別是固相載體的包被難達(dá)到各個(gè)體之間的*，因此在定量測(cè)定中，每批測(cè)試均須用一系列不同濃度的參考標(biāo)準(zhǔn)品在相同的條件下制作標(biāo)準(zhǔn)曲線。測(cè)定大分子量物質(zhì)的夾心法ELISA，標(biāo)準(zhǔn)曲線的范圍一般較寬，曲線zui高點(diǎn)的吸光度可接近2.0，繪制時(shí)常用半對(duì)數(shù)紙，以檢測(cè)物的濃度為橫坐標(biāo)，以吸光度為縱坐標(biāo)，將各濃度的值逐點(diǎn)連接，所得曲線一般呈S形，其頭、尾部曲線趨于平坦，PGA Elisa kit中央較呈直線的部分是的檢測(cè)區(qū)域。

PGA Elisa kit技術(shù)操作要點(diǎn)：

1. 標(biāo)本的采取和保存。
2. 試劑的準(zhǔn)備
3. 加樣。
4. 保溫。
5. 洗滌。
6. 顯色和比色。
7. 酶標(biāo)比色儀。
8. 結(jié)果判斷。

將抗原或抗體固定在過(guò)程稱為包被(coating)。換言之，包被即是抗原或抗體結(jié)合到固相載體表面的過(guò)程。PGA Elisa kit蛋白質(zhì)與聚苯乙烯固相載體是通過(guò)物理吸附結(jié)合的，靠的是蛋白質(zhì)分子結(jié)構(gòu)上的疏水基團(tuán)與固相載體表面的疏水基團(tuán)間的作用于。這種物理吸附是非特異性的，受蛋白質(zhì)的分子量、等電點(diǎn)、濃度等的影響。載體對(duì)不同蛋白質(zhì)的吸附能力是不相同的，大分子蛋白質(zhì)較小分子蛋白質(zhì)通常含有更多的疏水基團(tuán)，故更易吸附到固相載體表面。IgG對(duì)聚苯乙烯等固相具有較強(qiáng)的吸附力，其聯(lián)結(jié)多發(fā)生在Fc段上，抗體結(jié)合點(diǎn)暴露于外，因此抗體的包被一般均采用直接吸附法。蛋白質(zhì)抗原大多也可采用與抗體相似的方法包被。當(dāng)抗原決定簇存在于或鄰近于疏水區(qū)域時(shí)，抗原與固相載體的直接吸附可使抗原決定簇不能充分暴露，在這種情況下，PGA Elisa kit直接包被效果不佳，可以采用間接的捕獲包被法，即先將針對(duì)該抗原的特異抗體作預(yù)包被，其后通過(guò)抗原抗體反應(yīng)使抗原固相化。此間接結(jié)合在固相上的抗原遠(yuǎn)離載體表面，其抗原決定簇也得以充分暴露。間接包被的抗原經(jīng)固相抗體的親和層析作用，包被在固相上的抗原純度大大提高，因此含雜質(zhì)較多的抗原也可采用捕獲包被法，試驗(yàn)的特異性、敏感性均由此得以改善，重復(fù)性亦佳。間接包被的另一優(yōu)點(diǎn)是抗原用量少，僅為直接包被的1/10乃至于/100。不易吸附在聚苯乙烯載體上的非蛋白質(zhì)抗原可采用特殊的包被方式。例如，在檢測(cè)抗DNA抗體時(shí)，需用DNA作為包被抗原，而普遍的固相載體一般不能直接與核酸結(jié)合?？蓪⒕郾揭蚁┌逑冉?jīng)紫外線照射（例如30W紫外燈，75cm照射12小時(shí)），以增加其吸附性能。固相載體先用堿性蛋白質(zhì)，如聚賴氨酸、*等作預(yù)包被，也可提高核酸的結(jié)合力。也可用親和素*系統(tǒng)作間接包被，PGA Elisa kit即用親和素先包被載體，然后加入*化的DNA，這種包被方法均勻、牢固，已擴(kuò)大應(yīng)用于各種抗原物質(zhì)的定量測(cè)定。

脂類物質(zhì)無(wú)法與固相載體結(jié)合，可將其在有機(jī)溶劑（例如乙醇）中溶解后加入ELISA板孔中，開(kāi)蓋置冰箱過(guò)夜或冷風(fēng)吹干，待酒精揮發(fā)后，讓脂質(zhì)自然干固在固相表面?？剐牧字贵w的ELISA試劑一般采用這種包被方式。

PGA Elisa kit相關(guān)產(chǎn)品*：xyA386Ra    大鼠脂蛋白脂酶(LIPD)ELISA試劑盒    ELISA Kit for LipaHZ, Lipoprotein (LIPD)    檢測(cè)范圍： 10.358-1000pg/ml    
xyA593Ra    大鼠肌原纖蛋白1(FBN1)ELISA試劑盒    ELISA Kit for Fibrillin 1 (FBN1)    檢測(cè)范圍： 10.358-1000pg/ml    
xyA029Ra    大鼠E選擇素(HZLE)ELISA試劑盒    ELISA Kit for HZlectin, Endothelium (HZLE)    檢測(cè)范圍： 10.358-1000pg/ml    
xyA387Ra    大鼠補(bǔ)體3a(C3a)ELISA試劑盒    ELISA Kit for Complement Component 3a (C3a)    檢測(cè)范圍： 10.358-1000pg/ml    
xyA388Ra    大鼠補(bǔ)體成分5a(C5a)ELISA試劑盒    ELISA Kit for Complement Component 5a (C5a)    檢測(cè)范圍： 10.358-1000pg/ml    
xyA884Ra    大鼠二肽基肽酶Ⅳ(DPP4)ELISA試劑盒    ELISA Kit for Dipeptidyl PeptidaHZ IV (DPP4)    檢測(cè)范圍： 10.358-1000pg/ml    
xyA811Ra    大鼠血管緊張素Ⅰ(AngⅠ)ELISA試劑盒    ELISA Kit for Angiotensin I (AngI)    檢測(cè)范圍： 10.358-1000pg/ml    
xyA594Ra    大鼠*(CYCS)ELISA試劑盒    ELISA Kit for Cytochrome C, Somatic (CYCS)    檢測(cè)范圍： 10.358-1000pg/ml    
xyA812Ra    大鼠胰淀素(IAPP)ELISA試劑盒    ELISA Kit for Islet Amyloid Polypeptide (IAPP)    檢測(cè)范圍： 10.358-1000pg/ml    
xyA798Ra    大鼠低氧誘導(dǎo)因子1α(HIF1α)ELISA試劑盒    ELISA Kit for Hypoxia Inducible Factor 1 Alpha (HIF1a)    檢測(cè)范圍： 10.358-1000pg/ml    
xyA823Ra    大鼠90kDa熱休克蛋白β1(HSP90β1)ELISA試劑盒    ELISA Kit for Heat Shock Protein 90kDa Beta 1 (HSP90b1)    檢測(cè)范圍： 10.358-1000pg/ml    
xyB960Ra    大鼠超氧化物歧化酶1(SOD1)ELISA試劑盒    ELISA Kit for Superoxide DismutaHZ 1, Soluble (SOD1)    檢測(cè)范圍： 10.358-1000pg/ml    
xyA822Ra    大鼠60kD熱休克蛋白(HSPD1)ELISA試劑盒    ELISA Kit for Heat Shock 60kD Protein 1, Chaperonin (HSPD1)    檢測(cè)范圍： 10.358-1000pg/ml    
xyA815Ra    大鼠神經(jīng)型一氧化氮合酶()ELISA試劑盒    ELISA Kit for Nitric Oxide SynthaHZ 1, Neuronal ()    檢測(cè)范圍： 10.358-1000pg/ml    
xyA909Ra    大鼠銅藍(lán)蛋白(CP)ELISA試劑盒    ELISA Kit for HZruloplasmin (CP)    檢測(cè)范圍： 10.358-1000pg/ml    
xyA817Ra    大鼠結(jié)合珠蛋白(Hpt)ELISA試劑盒    ELISA Kit for Haptoglobin (Hpt)    檢測(cè)范圍： 10.358-1000pg/ml    
xyA068Ra    大鼠神經(jīng)膠質(zhì)纖維酸性蛋白(GFAP)ELISA試劑盒    ELISA Kit for Glial Fibrillary Acidic Protein (GFAP)    檢測(cè)范圍： 10.358-1000pg/ml    
xyA821Ra    大鼠C反應(yīng)蛋白(CRP)ELISA試劑盒    ELISA Kit for C Reactive Protein (CRP)    檢測(cè)范圍： 10.358-1000pg/ml    
xyA886Ra    大鼠過(guò)氧化物酶體增殖物激活受體γ(PPARγ)ELISA試劑盒    ELISA Kit for Peroxisome Proliferator Activated ReHZptor Gamma (PPARg)    檢測(cè)范圍： 10.358-1000pg/ml    
xyA856Hu    人Apelin 12蛋白(AP12)ELISA試劑盒    ELISA Kit for Apelin 12 (AP12)    檢測(cè)范圍： 10.358-1000pg/ml    
xyA853Ra    大鼠胱天蛋白酶8(CASP8)ELISA試劑盒    ELISA Kit for CaspaHZ 8 (CASP8)    檢測(cè)范圍： 10.358-1000pg/ml