ELSIA操作步驟復(fù)雜，影響反應(yīng)因素較多，PD Elisa kit特別是固相載體的包被難達(dá)到各個(gè)體之間的*，因此在定量測(cè)定中，每批測(cè)試均須用一系列不同濃度的參考標(biāo)準(zhǔn)品在相同的條件下制作標(biāo)準(zhǔn)曲線。測(cè)定大分子量物質(zhì)的夾心法ELISA，標(biāo)準(zhǔn)曲線的范圍一般較寬，曲線zui高點(diǎn)的吸光度可接近2.0，繪制時(shí)常用半對(duì)數(shù)紙，以檢測(cè)物的濃度為橫坐標(biāo)，以吸光度為縱坐標(biāo)，將各濃度的值逐點(diǎn)連接，所得曲線一般呈S形，其頭、尾部曲線趨于平坦，PD Elisa kit中央較呈直線的部分是的檢測(cè)區(qū)域。

PD Elisa kit技術(shù)操作要點(diǎn)：

1. 標(biāo)本的采取和保存。
2. 試劑的準(zhǔn)備
3. 加樣。
4. 保溫。
5. 洗滌。
6. 顯色和比色。
7. 酶標(biāo)比色儀。
8. 結(jié)果判斷。

將抗原或抗體固定在過程稱為包被(coating)。換言之，包被即是抗原或抗體結(jié)合到固相載體表面的過程。PD Elisa kit蛋白質(zhì)與聚苯乙烯固相載體是通過物理吸附結(jié)合的，靠的是蛋白質(zhì)分子結(jié)構(gòu)上的疏水基團(tuán)與固相載體表面的疏水基團(tuán)間的作用于。這種物理吸附是非特異性的，受蛋白質(zhì)的分子量、等電點(diǎn)、濃度等的影響。載體對(duì)不同蛋白質(zhì)的吸附能力是不相同的，大分子蛋白質(zhì)較小分子蛋白質(zhì)通常含有更多的疏水基團(tuán)，故更易吸附到固相載體表面。IgG對(duì)聚苯乙烯等固相具有較強(qiáng)的吸附力，其聯(lián)結(jié)多發(fā)生在Fc段上，抗體結(jié)合點(diǎn)暴露于外，因此抗體的包被一般均采用直接吸附法。蛋白質(zhì)抗原大多也可采用與抗體相似的方法包被。當(dāng)抗原決定簇存在于或鄰近于疏水區(qū)域時(shí)，抗原與固相載體的直接吸附可使抗原決定簇不能充分暴露，在這種情況下，PD Elisa kit直接包被效果不佳，可以采用間接的捕獲包被法，即先將針對(duì)該抗原的特異抗體作預(yù)包被，其后通過抗原抗體反應(yīng)使抗原固相化。此間接結(jié)合在固相上的抗原遠(yuǎn)離載體表面，其抗原決定簇也得以充分暴露。間接包被的抗原經(jīng)固相抗體的親和層析作用，包被在固相上的抗原純度大大提高，因此含雜質(zhì)較多的抗原也可采用捕獲包被法，試驗(yàn)的特異性、敏感性均由此得以改善，重復(fù)性亦佳。間接包被的另一優(yōu)點(diǎn)是抗原用量少，僅為直接包被的1/10乃至于/100。不易吸附在聚苯乙烯載體上的非蛋白質(zhì)抗原可采用特殊的包被方式。例如，在檢測(cè)抗DNA抗體時(shí)，需用DNA作為包被抗原，而普遍的固相載體一般不能直接與核酸結(jié)合?？蓪⒕郾揭蚁┌逑冉?jīng)紫外線照射（例如30W紫外燈，75cm照射12小時(shí)），以增加其吸附性能。固相載體先用堿性蛋白質(zhì)，如聚賴氨酸、*等作預(yù)包被，也可提高核酸的結(jié)合力。也可用親和素*系統(tǒng)作間接包被，PD Elisa kit即用親和素先包被載體，然后加入*化的DNA，這種包被方法均勻、牢固，已擴(kuò)大應(yīng)用于各種抗原物質(zhì)的定量測(cè)定。

脂類物質(zhì)無法與固相載體結(jié)合，可將其在有機(jī)溶劑（例如乙醇）中溶解后加入ELISA板孔中，開蓋置冰箱過夜或冷風(fēng)吹干，待酒精揮發(fā)后，讓脂質(zhì)自然干固在固相表面?？剐牧字贵w的ELISA試劑一般采用這種包被方式。

PD Elisa kit相關(guān)產(chǎn)品*：xyB212Ra    大鼠嗜鉻蛋白A(CHGA)ELISA試劑盒    ELISA Kit for Chromogranin A (CHGA)     檢測(cè)范圍： 10.358-1000pg/ml    
xyB367Ra    大鼠血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子受體2(VEGFR2)ELISA試劑盒    ELISA Kit for Vascular Endothelial Growth Factor ReHZptor 2 (VEGFR2)     檢測(cè)范圍： 10.358-1000pg/ml    
xyB044Ra    大鼠膽囊收縮素八肽(CCK8)ELISA試劑盒    ELISA Kit for Cholecystokinin 8, Octapeptide (CCK8)     檢測(cè)范圍： 10.358-1000pg/ml    
xyA756Ra    大鼠粘蛋白5AC(MUC5AC)ELISA試劑盒    ELISA Kit for Mucin 5 Subtype AC (MUC5AC)     檢測(cè)范圍： 10.358-1000pg/ml    
xyC034Ra    大鼠生長(zhǎng)分化因子15(GDF15)ELISA試劑盒    ELISA Kit for Growth Differentiation Factor 15 (GDF15)     檢測(cè)范圍： 10.358-1000pg/ml    
xyB969Ra    大鼠補(bǔ)體成分5(C5)ELISA試劑盒    ELISA Kit for Complement Component 5 (C5)     檢測(cè)范圍： 10.358-1000pg/ml    
xyB979Ra    大鼠鐵調(diào)素(Hepc)ELISA試劑盒    ELISA Kit for Hepcidin (Hepc)     檢測(cè)范圍： 10.358-1000pg/ml    
xyC047Ra    大鼠Ki-67蛋白(Ki67P)ELISA試劑盒    ELISA Kit for Ki-67 Protein (Ki67P)     檢測(cè)范圍： 10.358-1000pg/ml    
xyB070Ra    大鼠類*(TPS)ELISA試劑盒    ELISA Kit for TryptaHZ (TPS)     檢測(cè)范圍： 10.358-1000pg/ml    
xyB479Ra    大鼠肝素結(jié)合性表皮生長(zhǎng)因子(HBEGF)ELISA試劑盒    ELISA Kit for Heparin Binding Epidermal Growth Factor Like Growth Factor (HBEGF)     檢測(cè)范圍： 10.358-1000pg/ml    
xyB867Ra    大鼠表皮生長(zhǎng)因子受體2(EGFR2)ELISA試劑盒    ELISA Kit for Epidermal Growth Factor ReHZptor 2 (EGFR2)     檢測(cè)范圍： 10.358-1000pg/ml    
xyC057Ra    大鼠核因子κB受體激活因子(RANκ)ELISA試劑盒    ELISA Kit for ReHZptor Activator Of Nuclear Factor Kappa B (RANk)     檢測(cè)范圍： 10.358-1000pg/ml    
xyB416Ra    大鼠葡萄糖苷酸酶β(GUSβ)ELISA試劑盒    ELISA Kit for GlucuronidaHZ Beta (GUSb)     檢測(cè)范圍： 10.358-1000pg/ml    
xyA667Ra    大鼠葡萄糖激酶(GCK)ELISA試劑盒    ELISA Kit for GlucokinaHZ (GCK)     檢測(cè)范圍： 10.358-1000pg/ml    
xyA363Ra    大鼠血小板內(nèi)皮細(xì)胞粘附分子1(PECAM1)ELISA試劑盒    ELISA Kit for Plaet/Endothelial HZll Adhesion Molecule (PECAM1)     檢測(cè)范圍： 10.358-1000pg/ml    
xyB623Ra    大鼠表面活性物質(zhì)關(guān)聯(lián)蛋白C(SPC)ELISA試劑盒    ELISA Kit for Surfactant Associated Protein C (SPC)     檢測(cè)范圍： 10.358-1000pg/ml    
xyC023Ra    大鼠葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白4(GLUT4)ELISA試劑盒    ELISA Kit for GlucoHZ Transporter 4 (GLUT4)     檢測(cè)范圍： 10.358-1000pg/ml    
xyA150Ra    大鼠癌胚抗原(HZA)ELISA試劑盒    ELISA Kit for Carcinoembryonic Antigen (HZA)     檢測(cè)范圍： 10.358-1000pg/ml    
xyB438Ra    大鼠*羥化酶(TH)ELISA試劑盒    ELISA Kit for Tyrosine HydroxylaHZ (TH)     檢測(cè)范圍： 10.358-1000pg/ml    
xyA178Ra    大鼠α2-HS糖蛋白(αHSG)ELISA試劑盒    ELISA Kit for Alpha-2-Heremans Schmid Glycoprotein (aHSG)     檢測(cè)范圍： 10.358-1000pg/ml    
xyA446Ra    大鼠抑制素βC(INHβC)ELISA試劑盒    ELISA Kit for Inhibin Beta C (INHbC)     檢測(cè)范圍： 10.358-1000pg/ml