ELSIA操作步驟復(fù)雜，影響反應(yīng)因素較多，PCX Elisa kit特別是固相載體的包被難達(dá)到各個(gè)體之間的*，因此在定量測定中，每批測試均須用一系列不同濃度的參考標(biāo)準(zhǔn)品在相同的條件下制作標(biāo)準(zhǔn)曲線。測定大分子量物質(zhì)的夾心法ELISA，標(biāo)準(zhǔn)曲線的范圍一般較寬，曲線zui高點(diǎn)的吸光度可接近2.0，繪制時(shí)常用半對數(shù)紙，以檢測物的濃度為橫坐標(biāo)，以吸光度為縱坐標(biāo)，將各濃度的值逐點(diǎn)連接，所得曲線一般呈S形，其頭、尾部曲線趨于平坦，PCX Elisa kit中央較呈直線的部分是的檢測區(qū)域。

PCX Elisa kit技術(shù)操作要點(diǎn)：

1. 標(biāo)本的采取和保存。
2. 試劑的準(zhǔn)備
3. 加樣。
4. 保溫。
5. 洗滌。
6. 顯色和比色。
7. 酶標(biāo)比色儀。
8. 結(jié)果判斷。

將抗原或抗體固定在過程稱為包被(coating)。換言之，包被即是抗原或抗體結(jié)合到固相載體表面的過程。PCX Elisa kit蛋白質(zhì)與聚苯乙烯固相載體是通過物理吸附結(jié)合的，靠的是蛋白質(zhì)分子結(jié)構(gòu)上的疏水基團(tuán)與固相載體表面的疏水基團(tuán)間的作用于。這種物理吸附是非特異性的，受蛋白質(zhì)的分子量、等電點(diǎn)、濃度等的影響。載體對不同蛋白質(zhì)的吸附能力是不相同的，大分子蛋白質(zhì)較小分子蛋白質(zhì)通常含有更多的疏水基團(tuán)，故更易吸附到固相載體表面。IgG對聚苯乙烯等固相具有較強(qiáng)的吸附力，其聯(lián)結(jié)多發(fā)生在Fc段上，抗體結(jié)合點(diǎn)暴露于外，因此抗體的包被一般均采用直接吸附法。蛋白質(zhì)抗原大多也可采用與抗體相似的方法包被。當(dāng)抗原決定簇存在于或鄰近于疏水區(qū)域時(shí)，抗原與固相載體的直接吸附可使抗原決定簇不能充分暴露，在這種情況下，PCX Elisa kit直接包被效果不佳，可以采用間接的捕獲包被法，即先將針對該抗原的特異抗體作預(yù)包被，其后通過抗原抗體反應(yīng)使抗原固相化。此間接結(jié)合在固相上的抗原遠(yuǎn)離載體表面，其抗原決定簇也得以充分暴露。間接包被的抗原經(jīng)固相抗體的親和層析作用，包被在固相上的抗原純度大大提高，因此含雜質(zhì)較多的抗原也可采用捕獲包被法，試驗(yàn)的特異性、敏感性均由此得以改善，重復(fù)性亦佳。間接包被的另一優(yōu)點(diǎn)是抗原用量少，僅為直接包被的1/10乃至于/100。不易吸附在聚苯乙烯載體上的非蛋白質(zhì)抗原可采用特殊的包被方式。例如，在檢測抗DNA抗體時(shí)，需用DNA作為包被抗原，而普遍的固相載體一般不能直接與核酸結(jié)合。可將聚苯乙烯板先經(jīng)紫外線照射（例如30W紫外燈，75cm照射12小時(shí)），以增加其吸附性能。固相載體先用堿性蛋白質(zhì)，如聚賴氨酸、*等作預(yù)包被，也可提高核酸的結(jié)合力。也可用親和素*系統(tǒng)作間接包被，PCX Elisa kit即用親和素先包被載體，然后加入*化的DNA，這種包被方法均勻、牢固，已擴(kuò)大應(yīng)用于各種抗原物質(zhì)的定量測定。

脂類物質(zhì)無法與固相載體結(jié)合，可將其在有機(jī)溶劑（例如乙醇）中溶解后加入ELISA板孔中，開蓋置冰箱過夜或冷風(fēng)吹干，待酒精揮發(fā)后，讓脂質(zhì)自然干固在固相表面?？剐牧字贵w的ELISA試劑一般采用這種包被方式。

PCX Elisa kit相關(guān)產(chǎn)品*：xyH650Ra    大鼠黑素瘤抑制性活性蛋白1(MIA1)ELISA試劑盒    ELISA Kit for Melanoma Inhibitory Activity Protein 1 (MIA1)     檢測范圍： 10.358-1000pg/ml    
xyD977Ra    大鼠腎上腺素能受體α2C(ADRα2C)ELISA試劑盒    ELISA Kit for Adrenergic ReHZptor Alpha 2C (ADRa2C)     檢測范圍： 10.358-1000pg/ml    
xyB074Mu    小鼠多聚免疫球蛋白受體(PIGR)ELISA試劑盒    ELISA Kit for Polymeric Immunoglobulin ReHZptor (PIGR)     檢測范圍： 10.358-1000pg/ml    
xyC268Ra    大鼠11-β-羥基類固醇脫氫酶1(HSD11β1)ELISA試劑盒    ELISA Kit for 11-Beta-Hydroxysteroid DehydrogenaHZ Type 1 (HSD11b1)     檢測范圍： 10.358-1000pg/ml    
xyG850Ra    大鼠促泌素(SCGN)ELISA試劑盒    ELISA Kit for HZcretagogin (SCGN)     檢測范圍： 10.358-1000pg/ml    
xyA595Ra    大鼠*Ⅵ(F6)ELISA試劑盒    ELISA Kit for Coagulation Factor VI (F6)     檢測范圍： 10.358-1000pg/ml    
xyL817Ra    大鼠無翅型MMTV整合位點(diǎn)家族成員4(WNT4)ELISA試劑盒    ELISA Kit for Wingless Type MMTV Integration Site Family, Member 4 (WNT4)     檢測范圍： 10.358-1000pg/ml    
xyB995Ra    大鼠血幼素(HJV)ELISA試劑盒    ELISA Kit for Hemojuvelin (HJV)     檢測范圍： 10.358-1000pg/ml    
xyA464Ra    大鼠鹽皮質(zhì)激素受體(MR)ELISA試劑盒    ELISA Kit for Mineralocorticoid ReHZptor (MR)     檢測范圍： 10.358-1000pg/ml    
xyE801Ra    大鼠AMPA離子能*受體1(GRIA1)ELISA試劑盒    ELISA Kit for Glutamate ReHZptor, Ionotropic, AMPA 1 (GRIA1)     檢測范圍： 10.358-1000pg/ml    
xyE805Ra    大鼠N-甲基-D-天氡氨酸離子能*受體1(GRIN1)ELISA試劑盒    ELISA Kit for Glutamate ReHZptor, Ionotropic, N-Methyl-D-Aspartate 1 (GRIN1)     檢測范圍： 10.358-1000pg/ml    
xyB634Ra    大鼠骨骼肌肌動蛋白α1(ACTα1)ELISA試劑盒    ELISA Kit for Actin Alpha 1, Skeletal Muscle (ACTa1)     檢測范圍： 10.358-1000pg/ml    
xyD419Ra    大鼠肌球蛋白重鏈6(MYH6)ELISA試劑盒    ELISA Kit for Myosin Heavy Chain 6, Cardiac Muscle, Alpha (MYH6)     檢測范圍： 10.358-1000pg/ml    
xyF836Ra    大鼠轉(zhuǎn)化受體電位陽離子通道亞家族M成員6(TRPM6)ELISA試劑盒    ELISA Kit for Transient ReHZptor Potential Cation Channel Subfamily M, Member 6 (TRPM6)     檢測范圍： 10.358-1000pg/ml    
xyF837Ra    大鼠轉(zhuǎn)化受體電位陽離子通道亞家族M成員7(TRPM7)ELISA試劑盒    ELISA Kit for Transient ReHZptor Potential Cation Channel Subfamily M, Member 7 (TRPM7)     檢測范圍： 10.358-1000pg/ml    
xyB626Ra    大鼠白介素10受體α(IL10Rα)ELISA試劑盒    ELISA Kit for Interleukin 10 ReHZptor Alpha (IL10Ra)     檢測范圍： 10.358-1000pg/ml    
xyB638Ra    大鼠白介素10受體β(IL10Rβ)ELISA試劑盒    ELISA Kit for Interleukin 10 ReHZptor Beta (IL10Rb)     檢測范圍： 10.358-1000pg/ml    
xyB874Ra    大鼠*Ⅶ(F7)ELISA試劑盒    ELISA Kit for Coagulation Factor VII (F7)     檢測范圍： 10.358-1000pg/ml    
xyB120Ra    大鼠*酶(Arg)ELISA試劑盒    ELISA Kit for ArginaHZ (Arg)     檢測范圍： 10.358-1000pg/ml    
xyF416Ra    大鼠巢蛋白2(NID2)ELISA試劑盒    ELISA Kit for Nidogen 2 (NID2)     檢測范圍： 10.358-1000pg/ml    
xyB404Ra    大鼠Thy1細(xì)胞表面抗原(Thy1)ELISA試劑盒    ELISA Kit for Thy1 HZll SurfaHZ Antigen (Thy1)     檢測范圍： 10.358-1000pg/ml    
xyG515Ra    大鼠肥大細(xì)胞類*1(CMA1)ELISA試劑盒    ELISA Kit for ChymaHZ 1, Mast HZll (CMA1)     檢測范圍： 10.358-1000pg/ml