ELSIA操作步驟復(fù)雜，影響反應(yīng)因素較多，OFQ Elisa kit特別是固相載體的包被難達(dá)到各個(gè)體之間的*，因此在定量測定中，每批測試均須用一系列不同濃度的參考標(biāo)準(zhǔn)品在相同的條件下制作標(biāo)準(zhǔn)曲線。測定大分子量物質(zhì)的夾心法ELISA，標(biāo)準(zhǔn)曲線的范圍一般較寬，曲線zui高點(diǎn)的吸光度可接近2.0，繪制時(shí)常用半對(duì)數(shù)紙，以檢測物的濃度為橫坐標(biāo)，以吸光度為縱坐標(biāo)，將各濃度的值逐點(diǎn)連接，所得曲線一般呈S形，其頭、尾部曲線趨于平坦，OFQ Elisa kit中央較呈直線的部分是的檢測區(qū)域。

OFQ Elisa kit技術(shù)操作要點(diǎn)：

1. 標(biāo)本的采取和保存。
2. 試劑的準(zhǔn)備
3. 加樣。
4. 保溫。
5. 洗滌。
6. 顯色和比色。
7. 酶標(biāo)比色儀。
8. 結(jié)果判斷。

將抗原或抗體固定在過程稱為包被(coating)。換言之，包被即是抗原或抗體結(jié)合到固相載體表面的過程。OFQ Elisa kit蛋白質(zhì)與聚苯乙烯固相載體是通過物理吸附結(jié)合的，靠的是蛋白質(zhì)分子結(jié)構(gòu)上的疏水基團(tuán)與固相載體表面的疏水基團(tuán)間的作用于。這種物理吸附是非特異性的，受蛋白質(zhì)的分子量、等電點(diǎn)、濃度等的影響。載體對(duì)不同蛋白質(zhì)的吸附能力是不相同的，大分子蛋白質(zhì)較小分子蛋白質(zhì)通常含有更多的疏水基團(tuán)，故更易吸附到固相載體表面。IgG對(duì)聚苯乙烯等固相具有較強(qiáng)的吸附力，其聯(lián)結(jié)多發(fā)生在Fc段上，抗體結(jié)合點(diǎn)暴露于外，因此抗體的包被一般均采用直接吸附法。蛋白質(zhì)抗原大多也可采用與抗體相似的方法包被。當(dāng)抗原決定簇存在于或鄰近于疏水區(qū)域時(shí)，抗原與固相載體的直接吸附可使抗原決定簇不能充分暴露，在這種情況下，OFQ Elisa kit直接包被效果不佳，可以采用間接的捕獲包被法，即先將針對(duì)該抗原的特異抗體作預(yù)包被，其后通過抗原抗體反應(yīng)使抗原固相化。此間接結(jié)合在固相上的抗原遠(yuǎn)離載體表面，其抗原決定簇也得以充分暴露。間接包被的抗原經(jīng)固相抗體的親和層析作用，包被在固相上的抗原純度大大提高，因此含雜質(zhì)較多的抗原也可采用捕獲包被法，試驗(yàn)的特異性、敏感性均由此得以改善，重復(fù)性亦佳。間接包被的另一優(yōu)點(diǎn)是抗原用量少，僅為直接包被的1/10乃至于/100。不易吸附在聚苯乙烯載體上的非蛋白質(zhì)抗原可采用特殊的包被方式。例如，在檢測抗DNA抗體時(shí)，需用DNA作為包被抗原，而普遍的固相載體一般不能直接與核酸結(jié)合?？蓪⒕郾揭蚁┌逑冉?jīng)紫外線照射（例如30W紫外燈，75cm照射12小時(shí)），以增加其吸附性能。固相載體先用堿性蛋白質(zhì)，如聚賴氨酸、*等作預(yù)包被，也可提高核酸的結(jié)合力。也可用親和素*系統(tǒng)作間接包被，OFQ Elisa kit即用親和素先包被載體，然后加入*化的DNA，這種包被方法均勻、牢固，已擴(kuò)大應(yīng)用于各種抗原物質(zhì)的定量測定。

脂類物質(zhì)無法與固相載體結(jié)合，可將其在有機(jī)溶劑（例如乙醇）中溶解后加入ELISA板孔中，開蓋置冰箱過夜或冷風(fēng)吹干，待酒精揮發(fā)后，讓脂質(zhì)自然干固在固相表面?？剐牧字贵w的ELISA試劑一般采用這種包被方式。

OFQ Elisa kit相關(guān)產(chǎn)品*：xyB011Mu    小鼠Runt相關(guān)轉(zhuǎn)錄因子2(RUNX2)檢測試劑盒    ELISA Kit for Runt Related Transcription Factor 2 (RUNX2)     檢測范圍： 11.254-1000pg/ml    
xyB910Mu    小鼠*7(KLK7)檢測試劑盒    ELISA Kit for Kallikrein 7 (KLK7)     檢測范圍： 11.254-1000pg/ml    
xyC343Mu    小鼠70kDa熱休克蛋白5(HSPA5)檢測試劑盒    ELISA Kit for Heat Shock 70kDa Protein 5 (HSPA5)     檢測范圍： 11.254-1000pg/ml    
xyL941Mu    小鼠激活T-細(xì)胞核因子1(NFATC1)檢測試劑盒    ELISA Kit for Nuclear Factor Of Activated T-Cells, Cytoplasmic 1 (NFATC1)     檢測范圍： 11.254-1000pg/ml    
xyN863Mu    小鼠Osterix蛋白(OSX)檢測試劑盒    ELISA Kit for Osterix (OSX)     檢測范圍： 11.254-1000pg/ml    
xyF543Mu    小鼠溶血磷脂酸受體3(LPAR3)檢測試劑盒    ELISA Kit for Lysophosphatidic Acid Receptor 3 (LPAR3)     檢測范圍： 11.254-1000pg/ml    
xyD220Mu    小鼠胸腺旁腺素(PTMS)檢測試劑盒    ELISA Kit for Parathymosin (PTMS)     檢測范圍： 11.254-1000pg/ml    
xyD744Mu    小鼠脂解激活脂蛋白受體(LSR)檢測試劑盒    ELISA Kit for Lipolysis Stimulated Lipoprotein Receptor (LSR)     檢測范圍： 11.254-1000pg/ml    
xyD416Mu    小鼠肌球蛋白重鏈4(MYH4)檢測試劑盒    ELISA Kit for Myosin Heavy Chain 4, Skeletal Muscle (MYH4)     檢測范圍： 11.254-1000pg/ml    
xyA788Mu    小鼠細(xì)胞程序性死亡蛋白1配體1(PDCD1LG1)檢測試劑盒    ELISA Kit for Programmed Cell Death Protein 1 Ligand 1 (PDCD1LG1)     檢測范圍： 11.254-1000pg/ml    
xyC288Mu    小鼠同種異體移植炎癥因子1(AIF1)檢測試劑盒    ELISA Kit for Allograft Inflammatory Factor 1 (AIF1)     檢測范圍： 11.254-1000pg/ml    
xyC608Mu    小鼠黃嘌呤脫氫酶(XDH)檢測試劑盒    ELISA Kit for Xanthine Dehydrogenase (XDH)     檢測范圍： 11.254-1000pg/ml    
xyH097Mu    小鼠亞硫酸鹽氧化酶(SUOX)檢測試劑盒    ELISA Kit for Sulfite Oxidase (SUOX)     檢測范圍： 11.254-1000pg/ml    
xyD824Mu    小鼠血小板反應(yīng)蛋白4(THBS4)檢測試劑盒    ELISA Kit for Thrombospondin 4 (THBS4)     檢測范圍： 11.254-1000pg/ml    
xyD823Mu    小鼠血小板反應(yīng)蛋白3(THBS3)檢測試劑盒    ELISA Kit for Thrombospondin 3 (THBS3)     檢測范圍： 11.254-1000pg/ml    
xyC746Mu    小鼠外周鞘磷脂蛋白22(PMP22)檢測試劑盒    ELISA Kit for Peripheral Myelin Protein 22 (PMP22)     檢測范圍： 11.254-1000pg/ml    
xyT758Mu    小鼠1號(hào)染色體開放閱讀框85(C1orf85)檢測試劑盒    ELISA Kit for Chromosome 1 Open Reading Frame 85 (C1orf85)     檢測范圍： 11.254-1000pg/ml    
xyG501Mu    小鼠脂素1(LPIN1)檢測試劑盒    ELISA Kit for Lipin 1 (LPIN1)     檢測范圍： 11.254-1000pg/ml    
xyJ084Mu    小鼠卵泡抑素樣蛋白3(FSTL3)檢測試劑盒    ELISA Kit for Follistatin Like Protein 3 (FSTL3)     檢測范圍： 11.254-1000pg/ml    
xyG000Mu    小鼠神經(jīng)肽Y受體Y2(NPY2R)檢測試劑盒    ELISA Kit for Neuropeptide Y Receptor Y2 (NPY2R)     檢測范圍： 11.254-1000pg/ml