魚(yú)Bcl-2相關(guān)X(BAX)ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)原理
本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測(cè)定標(biāo)本中魚(yú)  Bcl-2 相關(guān) X(BAX)。用純化的魚(yú)Bcl-2相關(guān) X
(BAX)抗體包被微孔板，制成固相抗體，往包被單抗的微孔中依次加入Bcl-2(BAX)，再與 HRP標(biāo)記的  Bcl-2相關(guān)X (BAX)抗體 ，形成抗體-抗原-酶相關(guān)X標(biāo)抗體復(fù)合物，經(jīng)過(guò)*洗滌后加底物 TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的 Bcl-2相關(guān)X (BAX)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在 450nm 波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度（OD值），通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中魚(yú) Bcl-2 相關(guān) X(BAX)濃度。

魚(yú)Bcl-2相關(guān)X(BAX)ELISA試劑盒操作步驟
1.標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋?zhuān)罕驹噭┖刑峁┰稑?biāo)準(zhǔn)品一支，用戶可按照下列圖表在小試管中進(jìn)行稀釋。
2.加樣：分別設(shè)空白孔（空白對(duì)照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑，其余各步操作相同）、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測(cè)樣品孔。在酶標(biāo)包被板上標(biāo)準(zhǔn)品準(zhǔn)確加樣 50?l，待測(cè)樣品孔中先加樣品稀釋液 40?l，然后再加待測(cè)樣品 10?l（樣品zui終稀釋度為 5倍）。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動(dòng)混勻。
溫育：用封板膜封板后37℃溫育30分鐘。30倍稀釋后備用
配液：將 30倍濃
洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體甩干，每孔加滿洗滌液，靜重復(fù) 5次，拍干。30秒后棄去，如此
加酶：每孔加入酶標(biāo)試劑 50?l，空白孔除外。
溫育：操作同 3。
洗滌：操作同 5。
顯色：每孔先加入顯色劑 A50?l，再加入顯色劑 B50?l，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色10分鐘.以標(biāo)準(zhǔn)物的濃度為橫坐標(biāo)，OD值為縱坐標(biāo)，牛病毒性腹瀉抗體（BVDV Ab）ELISA試劑盒在坐標(biāo)紙上，魚(yú)Bcl-2相關(guān)X(BAX)ELISA試劑盒根據(jù)樣品的OD值由標(biāo)準(zhǔn)曲線查出相應(yīng)的濃度；再乘以稀釋倍數(shù)；或用標(biāo)準(zhǔn)物的濃度與OD值計(jì)算出標(biāo)準(zhǔn)曲線的直線回歸方程式，將樣品的 OD值代入方程式，計(jì)算出樣品濃度，再乘以稀釋倍數(shù)，即為樣品的實(shí)際濃度。
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