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上海酶聯(lián)生物研究所
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上海酶聯(lián)生物研究所
經(jīng)營(yíng)模式：生產(chǎn)廠(chǎng)家
商鋪產(chǎn)品：4010條
所在地區(qū)：上海上海市
聯(lián)系人：采購(gòu)部 （經(jīng)理）
閱讀：573發(fā)布時(shí)間：2012-7-10
人白細(xì)胞介素1（IL-1）酶聯(lián)免疫分析ELISA試劑盒使用說(shuō)明書(shū)
本試劑盒僅供研究使用。
檢測(cè)范圍： 96T
3 ng/L -120 ng/L
使用目的：
本試劑盒用于測(cè)定人血清、血漿及相關(guān)液體樣本中白細(xì)胞介素1（IL-1）含量。
實(shí)驗(yàn)原理
本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測(cè)定標(biāo)本中人白細(xì)胞介素 1（IL-1）水平。用純化的人白細(xì)胞
介素 1（IL-1）抗體包被微孔板，制成固相抗體，往包被單抗的微孔中依次加入白細(xì)胞介素
1（IL-1），再與 HRP 標(biāo)記的白細(xì)胞介素 1（IL-1）抗體結(jié)合，形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物，
經(jīng)過(guò)*洗滌后加底物TMB顯色。TMB 在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色，并在酸的作用下
轉(zhuǎn)化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的白細(xì)胞介素1（IL-1）呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm
人白細(xì)胞介素1（IL-1）酶聯(lián)免疫分析ELISA試劑盒使用說(shuō)明書(shū)
波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度（OD值），通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)計(jì)算樣品中人白細(xì)胞介素1（IL-1）濃度。
試劑盒組成
1 30 倍濃縮洗滌液 20ml×1 瓶 7 終止液 6ml×1 瓶
2 酶標(biāo)試劑 6ml×1 瓶 8 標(biāo)準(zhǔn)品（240 ng/L） 0.5ml×1 瓶
3 酶標(biāo)包被板 12 孔×8 條 9 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液 1.5ml×1 瓶
4 樣品稀釋液 6ml×1 瓶 10 說(shuō)明書(shū) 1 份
5 顯色劑A 液 6ml×1 瓶 11 封板膜 2 張
6 顯色劑B液 6ml×1/瓶 12 密封袋 1 個(gè)
標(biāo)本要求
1．標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取，提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行，提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。若不能
馬上進(jìn)行試驗(yàn)，可將標(biāo)本放于-20℃保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融
人白細(xì)胞介素1（IL-1）酶聯(lián)免疫分析ELISA試劑盒使用說(shuō)明書(shū)
2．不能檢測(cè)含NaN3的樣品，因 NaN3抑制辣根過(guò)氧化物酶的（HRP）活性。
操作步驟
1. 標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋?zhuān)罕驹噭┖刑峁┰稑?biāo)準(zhǔn)品一支，用戶(hù)可按照下列圖表在小試管中進(jìn)行稀
釋。
120 ng/L 5 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品 150μl的原倍標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
60 ng/L 4 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品 150μl的5 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
30 ng/L 3 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品 150μl的4 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
15 ng/L 2 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品 150μl的3 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
7.5 ng/L 1 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品 150μl的2 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
2. 加樣：分別設(shè)空白孔（空白對(duì)照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑，其余各步操作相同）、標(biāo)準(zhǔn)孔、
待測(cè)樣品孔。在酶標(biāo)包被板上標(biāo)準(zhǔn)品準(zhǔn)確加樣50μl，待測(cè)樣品孔中先加樣品稀釋液40μl，然后再加待測(cè)樣品10μl（樣品zui終稀釋度為5倍）。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部，盡
量不觸及孔壁，輕輕晃動(dòng)混勻。
3. 溫育：用封板膜封板后置37℃溫育30 分鐘。
4. 配液：將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用
5. 洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿(mǎn)洗滌液，靜置 30 秒后棄去，如此
重復(fù) 5次，拍干。
6. 加酶：每孔加入酶標(biāo)試劑50μl，空白孔除外。
7. 溫育：操作同 3。
8. 洗滌：操作同 5。
9. 顯色：每孔先加入顯色劑 A50μl，再加入顯色劑 B50μl，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色
15 分鐘.
10. 終止：每孔加終止液50μl，終止反應(yīng)（此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色）。
11. 測(cè)定：以空白空調(diào)零，450nm波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的吸光度（OD值）。 測(cè)定應(yīng)在加終止
液后 15分鐘以?xún)?nèi)進(jìn)行。
操作程序總結(jié)：
計(jì)算
以標(biāo)準(zhǔn)物的濃度為橫坐標(biāo)，OD 值為縱坐標(biāo)，在坐標(biāo)紙上繪出標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)，根據(jù)樣品的
OD值由標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)查出相應(yīng)的濃度；再乘以稀釋倍數(shù)；或用標(biāo)準(zhǔn)物的濃度與OD值計(jì)算出標(biāo)
準(zhǔn)曲線(xiàn)的直線(xiàn)回歸方程式，將樣品的OD值代入方程式，計(jì)算出樣品濃度，再乘以稀釋倍數(shù)，即為樣品的實(shí)際濃度。
注意事項(xiàng)
1．試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡 15-30 分鐘后方可使用，酶標(biāo)包被板開(kāi)封后如未
用完，板條應(yīng)裝入密封袋中保存。
2．濃洗滌液可能會(huì)有結(jié)晶析出，稀釋時(shí)可在水浴中加溫助溶，洗滌時(shí)不影響結(jié)果。
3．各步加樣均應(yīng)使用加樣器，并經(jīng)常校對(duì)其準(zhǔn)確性，以避免試驗(yàn)誤差。一次加樣時(shí)間
控制在5 分鐘內(nèi)，如標(biāo)本數(shù)量多，推薦使用排槍加樣。
4．請(qǐng)每次測(cè)定的同時(shí)做標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)，做復(fù)孔。如標(biāo)本中待測(cè)物質(zhì)含量過(guò)高（樣本OD值
大于標(biāo)準(zhǔn)品孔*孔的OD值），請(qǐng)先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)（n 倍）后再測(cè)定，計(jì)
算時(shí)請(qǐng)zui后乘以總稀釋倍數(shù)（×n×5）。
5．封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。
6．底物請(qǐng)避光保存。
7．嚴(yán)格按照說(shuō)明書(shū)的操作進(jìn)行，試驗(yàn)結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn).
8．所有樣品，洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。
9．本試劑不同批號(hào)組分不得混用。
10. 如與英文說(shuō)明書(shū)有異，以英文說(shuō)明書(shū)為準(zhǔn)。
保存條件及有效期
1．試劑盒保存：；2-8℃。
2．有效期：6個(gè)月 大鼠B細(xì)胞淋巴瘤因子2（Bcl-2）ELISA試劑盒
大鼠CXC趨化因子受體3（CXCR3）ELISA試劑盒
大鼠中性粒細(xì)胞彈性蛋白酶（NE）ELISA試劑盒
大鼠腫瘤特異生長(zhǎng)因子/腫瘤相關(guān)因子（TGSF）ELISA試劑盒
大鼠羥*（Hyp）ELISA試劑盒
大鼠骨保護(hù)素配體（OPGL）ELISA試劑盒
大鼠乳鐵傳遞蛋白/乳鐵蛋白（LF/LTF）ELISA試劑盒
大鼠抗肌內(nèi)膜抗體IgA（EMA IgA）ELISA試劑盒
大鼠鐵蛋白（FE）ELISA試劑盒
大鼠碳酸酐酶2（CA-2）ELISA試劑盒
大鼠色素上皮衍生因子（PEDF）ELISA試劑盒
大鼠解整合素樣金屬蛋白酶8（ADAM8）ELISA試劑盒
大鼠抗*（AT）ELISA試劑盒
商鋪：http://www.niunang.cn/st32881/
主營(yíng)產(chǎn)品：ELISA試劑盒，人ELISA試劑盒，小鼠ELISA試劑盒，豚鼠ELISA試劑盒，兔ELISA試劑盒，羊ELISA試劑盒，牛ELISA試劑盒，雞ELISA試劑盒，鴨ELISA試劑盒，植物ELISA試劑盒
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