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技術文章

細胞活力鑒定——臺盼藍染色法

閱讀：2718發(fā)布時間：2010-7-31

原理：
細胞損傷或死亡時，臺盼藍可穿透變性的細胞膜，與解體的DNA 結合，使其著色。而活細胞能阻止染料進入細胞內。故可以鑒別死細胞與活細胞。

用品：
1. 4%臺盼藍母液：稱取4g臺盼藍，加少量蒸餾水研磨，加雙蒸水至100ml，用濾紙過濾，4度保存。使用時。用PBS稀釋至0.4%。
2. 吸管、*、顯微鏡

步驟：
1、制備單細胞懸液。并作適當稀釋（106 細胞/ml）
2、染色：細胞懸液與0.4%臺盼藍溶液以9:1混合混勻。
3、計數：在三分鐘內，用計數板分別計數活細胞和死細胞

結果統(tǒng)計：
鏡下觀察，死細胞被染成淡藍色，而活細胞拒染。
根據下式求細胞活力：
活細胞率（%）= 活細胞總數/（活細胞總數+死細胞總數）×100

注意事項：臺盼藍染細胞時，時間不宜過長。否則，部分活細胞也會著色，會干擾計數。

 

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