好看日韩在线视频免费,日本不卡一区二区三区,三级a全过程在线观看,亚洲精品国产9999久久久久

行業(yè)產(chǎn)品

  • 行業(yè)產(chǎn)品

江萊生物-中國(guó)老牌試劑供應(yīng)商


當(dāng)前位置：江萊生物-中國(guó)老牌試劑供應(yīng)商>技術(shù)文章>細(xì)胞爬片制備詳細(xì)過(guò)程
技術(shù)文章

細(xì)胞爬片制備詳細(xì)過(guò)程

閱讀：111發(fā)布時(shí)間：2015-10-21

【爬片的準(zhǔn)備】

1.爬片可用一般的蓋玻片，也可用爬片；

 

2.應(yīng)用蓋玻片，可根據(jù)自己的需要剪裁成合適的大小，以備置于6孔板、12孔板或24孔板；裁剪時(shí)可用前護(hù)士輸液用于打開(kāi)玻璃安瓶的小沙輪，或者是口腔科的那種小沙輪，輕輕劃一下后，稍用力一掰就分開(kāi)了。

 

如果接種大皿的話，我一般不將蓋玻片切開(kāi)，直接清潔后放入培養(yǎng)皿中，到染色時(shí)再將之切開(kāi)，這樣既保證了細(xì)胞均一性，又可同時(shí)做幾個(gè)指標(biāo)的染色。

 

3.將剪裁好的爬片，置于濃硫酸中浸泡并過(guò)夜，第二天先用自來(lái)水沖洗20遍，再置于無(wú)水酒清中浸泡6小時(shí)，再用三蒸水沖洗3遍（個(gè)人認(rèn)為主要目的是將酸沖洗干凈就可以了，如果不干凈的話，細(xì)胞帖壁不好），放在飯盒或者玻璃培養(yǎng)皿中烘干后進(jìn)行高壓消毒。

 

4.高壓后取出放入烤箱中烤干，備用?？靖珊罂煞湃氤瑑襞_(tái)中。

 

5.關(guān)于多聚賴氨酸，很多人都將玻片用此處理，以使細(xì)胞與玻片結(jié)合更牢。但我在做爬片時(shí)從來(lái)沒(méi)用過(guò)多聚賴氨酸，細(xì)胞貼壁仍然很好，且在做后續(xù)的免疫細(xì)胞化學(xué)染色、TUNEL等凋亡檢測(cè)、免疫熒光等也從未脫過(guò)片。

 

 

 

【細(xì)胞爬片】

 

1.*消化細(xì)胞后計(jì)數(shù)重懸細(xì)胞于*培養(yǎng)基中。

 

2.加細(xì)胞時(shí)，根據(jù)玻片的大小，先在每個(gè)孔里準(zhǔn)備放爬片的位置滴少量培養(yǎng)基，目的是使玻片與培養(yǎng)皿靠培養(yǎng)基的張力粘合到一起，然后放玻片，防止加細(xì)胞懸液時(shí)玻片漂起，造成雙層細(xì)胞貼片。整個(gè)過(guò)程注意無(wú)菌操作。

 

3.根據(jù)自己的需要選擇合適的細(xì)胞密度種入培養(yǎng)板內(nèi)即可

 

4.待細(xì)胞貼壁后，可去上清加含藥培養(yǎng)基。

 

5.按照實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)，作用一定時(shí)間后取玻片。取玻片時(shí)由于玻片與培養(yǎng)皿底結(jié)合較緊，張力較大，我一般將注射器針頭針尖向背面弄個(gè)小鉤，這樣將爬片輕輕勾起，用小鑷子取出就可以了。如果要做諸如24h，48h，72h等這樣時(shí)間點(diǎn)的實(shí)驗(yàn)的話，將所需數(shù)量的爬片取出時(shí)應(yīng)用酒精燈火焰燒一下針頭和鑷子。末取出的可接著繼續(xù)培養(yǎng)。

 

 

 

 

 

 

【細(xì)胞爬片的固定】

 

細(xì)胞爬片取出后，一般用PBS洗2遍，然后再做固定。當(dāng)然，根據(jù)研究目的，PBS洗也不是一定要做的，比如做凋亡的TUNEL染色時(shí)就避免洗，因?yàn)榈蛲龅募?xì)胞在洗的過(guò)程中有可能會(huì)脫落。

 

另外在保存細(xì)胞爬片的時(shí)候，我一般用培養(yǎng)皿或板，先在皿底放一層面巾紙，然后再放爬片，這樣方便做實(shí)驗(yàn)時(shí)取片。然后蓋上蓋子，并在蓋子上做標(biāo)記，為避免混淆，可用透明膠帶將蓋子和皿連在一起。一般-20℃保存2-3個(gè)月的片子做免疫組化是沒(méi)有問(wèn)題的。

 

以下為常用的固定液

 

1. 冷丙酮 可用于一般的免疫組化染色。

將純的丙酮預(yù)先放入冰箱-20℃后便為冷丙酮（放心，丙酮在此溫度不會(huì)為固體的）細(xì)胞爬片取出后，PBS洗2遍，便可加入冷丙酮于-20℃（丙酮有很強(qiáng)的揮發(fā)性，注意將含有丙酮和爬片的器皿蓋嚴(yán)，防止其揮發(fā)）固定10分鐘。取出后，室溫吹干，然后放入-20℃保存。

 

2. 多聚甲醛(常用4%)：可用于免疫電鏡；也可用于免疫熒光以及TUNEL染色。 

主要檢測(cè)組織內(nèi)一些性能嬌弱的抗原特別是細(xì)胞表面抗原，例如各類淋巴細(xì)胸分化決定簇(CD)、主要組織相容性抗原等

室溫固定15分鐘后，將表面液體吹干，入-20℃保存

 

3. 95％乙醇，可用于免疫組化。

優(yōu)點(diǎn)：穿透性強(qiáng)、抗原性保存較好。

缺點(diǎn)：但醇類對(duì)低分子蛋白質(zhì)、多肽及胞漿內(nèi)蛋白質(zhì)保存效果較差，使蛋白變性的作用輕，固定后可再溶解；染色過(guò)程中，溫育時(shí)間長(zhǎng)，抗原可流失而減弱反應(yīng)強(qiáng)度

室溫固定15分鐘后，將表面液體吹干，入-20℃保存

 

4. 甲醛(福爾馬林)應(yīng)用zui廣 

優(yōu)點(diǎn)：形態(tài)結(jié)構(gòu)保存好，且穿透性強(qiáng)，

缺點(diǎn)： 甲醛放置過(guò)久可氧化為甲酸，使溶液pH降低，影響染色； 分子間交聯(lián)形成的網(wǎng)格結(jié)構(gòu)可能部分或*掩蓋某些抗原決定簇，使之不能充分暴露?？稍斐杉訇幮缘娜旧Y(jié)果。


產(chǎn)品：

CAS:33564-31-7,醋酸雙氟拉松現(xiàn)貨供應(yīng)醋酸雙氟拉松33564-31-7
CAS:119356-77-3,達(dá)泊西汀現(xiàn)貨供應(yīng)達(dá)泊西汀119356-77-3
CAS:147526-32-7,*現(xiàn)貨供應(yīng)*147526-32-7
CAS:1404-93-9,鹽酸*現(xiàn)貨供應(yīng)鹽酸*1404-93-9
CAS:274901-16-5,維他列汀現(xiàn)貨供應(yīng)維他列汀274901-16-5
CAS:804-30-8,*現(xiàn)貨供應(yīng)*804-30-8
CAS:53-43-0,去氫表雄酮現(xiàn)貨供應(yīng)去氫表雄酮53-43-0
CAS:147489-06-3,(3R,5S,6E)-7-[2-環(huán)丙基-4-(4-氟苯基)-3-喹啉-基]-2,2-二甲基-1,3-二氧六環(huán)-6-庚烯酸叔丁酯現(xiàn)貨供應(yīng)(3R,5S,6E)-7-[2-環(huán)丙基-4-(4-氟苯基)-3-喹啉-基]-2,2-二甲基-1,3-二氧六環(huán)-6-庚烯酸叔丁酯147489-06-3
CAS:231277-92-2,拉帕替尼現(xiàn)貨供應(yīng)拉帕替尼231277-92-2
CAS:55486-09-4,5-甲基-2'-甲氧基-尿苷現(xiàn)貨供應(yīng)5-甲基-2'-甲氧基-尿苷55486-09-4
CAS:315-37-7,庚酸睪酮現(xiàn)貨供應(yīng)庚酸睪酮315-37-7
CAS:58-20-8,環(huán)戊*現(xiàn)貨供應(yīng)環(huán)戊*58-20-8
CAS:69975-86-6,多索*現(xiàn)貨供應(yīng)多索*69975-86-6
CAS:79165-06-3,*現(xiàn)貨供應(yīng)*79165-06-3
CAS:611-53-0,5-碘-2'-脫氧胞苷現(xiàn)貨供應(yīng)5-碘-2'-脫氧胞苷611-53-0
CAS:2137-18-0,孕諾酮 Gestonorone現(xiàn)貨供應(yīng)孕諾酮 Gestonorone2137-18-0
CAS:148849-67-6,鹽酸伊伐布雷定現(xiàn)貨供應(yīng)鹽酸伊伐布雷定148849-67-6
CAS:104121-92-8,艾地骨化醇現(xiàn)貨供應(yīng)艾地骨化醇104121-92-8
CAS:1405-86-3,*現(xiàn)貨供應(yīng)*1405-86-3
CAS:70458-96-7,*現(xiàn)貨供應(yīng)*70458-96-7
CAS:80-49-9,溴甲基后馬托品現(xiàn)貨供應(yīng)溴甲基后馬托品80-49-9
CAS:1134-47-0,*現(xiàn)貨供應(yīng)*1134-47-0
CAS:521-12-0,屈他雄酮丙酸酯現(xiàn)貨供應(yīng)屈他雄酮丙酸酯521-12-0
CAS:84379-13-5,溴他西尼現(xiàn)貨供應(yīng)溴他西尼84379-13-5
CAS:1778-02-5,孕烯醇酮醋酸酯現(xiàn)貨供應(yīng)孕烯醇酮醋酸酯1778-02-5
CAS:471-53-4,甘草次酸現(xiàn)貨供應(yīng)甘草次酸471-53-4
CAS:1961-12-1,鹽酸辛因現(xiàn)貨供應(yīng)鹽酸辛1961-12-1
CAS:107868-30-4,*現(xiàn)貨供應(yīng)*107868-30-4
CAS:110119-84-1,Donepezil HCL現(xiàn)貨供應(yīng)Donepezil HCL110119-84-1
CAS:3416-24-8,D-氨基葡萄糖 Glucosamine現(xiàn)貨供應(yīng)D-氨基葡萄糖 Glucosamine3416-24-8
CAS:56392-17-7,*現(xiàn)貨供應(yīng)*56392-17-7
CAS:33818-15-4,胞磷*現(xiàn)貨供應(yīng)胞磷*33818-15-4
CAS:74011-58-8,*現(xiàn)貨供應(yīng)*74011-58-8
CAS:25316-40-9,鹽酸*現(xiàn)貨供應(yīng)鹽酸*25316-40-9
CAS:519-02-8,*現(xiàn)貨供應(yīng)*519-02-8
CAS:127294-70-6,*現(xiàn)貨供應(yīng)*127294-70-6
CAS:97468-37-6,芐星頭孢匹林現(xiàn)貨供應(yīng)芐星頭孢匹林97468-37-6
CAS:154598-52-4,依法韋侖現(xiàn)貨供應(yīng)依法韋侖154598-52-4
CAS:70458-95-6,* Pefloxacin Mesylate現(xiàn)貨供應(yīng)* Pefloxacin Mesylate70458-95-6
CAS:965-93-5,甲基群勃龍現(xiàn)貨供應(yīng)甲基群勃龍965-93-5
CAS:53716-50-0,奧吩噠唑現(xiàn)貨供應(yīng)奧吩噠唑53716-50-0
CAS:115550-35-1,麻保沙星現(xiàn)貨供應(yīng)麻保沙星115550-35-1
CAS:83915-83-7,* 現(xiàn)貨供應(yīng)* 83915-83-7
CAS:515815-47-1,*鈉現(xiàn)貨供應(yīng)*鈉515815-47-1
CAS:137512-74-4,甲氨基阿維菌素苯甲酸鹽現(xiàn)貨供應(yīng)甲氨基阿維菌素苯甲酸鹽137512-74-4
CAS:84371-65-3,*現(xiàn)貨供應(yīng)*84371-65-3
CAS:1405-54-5,酒石酸泰樂(lè)菌素現(xiàn)貨供應(yīng)酒石酸泰樂(lè)菌素1405-54-5
CAS:474-25-9,*現(xiàn)貨供應(yīng)*474-25-9
CAS:81246-79-9,5'-DMT -rU現(xiàn)貨供應(yīng)5'-DMT -rU81246-79-9
CAS:2687-94-7,N-辛基吡咯烷酮現(xiàn)貨供應(yīng)N-辛基吡咯烷酮2687-94-7
CAS:111696-23-2,鹽酸*酯現(xiàn)貨供應(yīng)鹽酸*酯111696-23-2
CAS:573-20-6,Vitamin K4現(xiàn)貨供應(yīng)Vitamin K4573-20-6
CAS:121-19-7,洛克沙生現(xiàn)貨供應(yīng)洛克沙生121-19-7
CAS:113981-44-5,鹽酸頭孢唑蘭現(xiàn)貨供應(yīng)鹽酸頭孢唑蘭113981-44-5
CAS:68-22-4,* 現(xiàn)貨供應(yīng)* 68-22-4
CAS:16846-24-5,*現(xiàn)貨供應(yīng)* 16846-24-5
CAS:130-95-0,奎寧堿現(xiàn)貨供應(yīng)奎寧堿130-95-0
CAS:67-45-8,*現(xiàn)貨供應(yīng)*67-45-8
CAS:15307-79-6,*現(xiàn)貨供應(yīng)*15307-79-6
CAS:80012-44-8,*現(xiàn)貨供應(yīng)*80012-44-8
CAS:60-56-0,甲巰基咪唑現(xiàn)貨供應(yīng)甲巰基咪唑60-56-0
CAS:6209-17-2  127-56-0,*鈉現(xiàn)貨供應(yīng)*鈉6209-17-2  127-56-0
CAS:79-83-4,D-*現(xiàn)貨供應(yīng)D-*79-83-4
CAS:97-59-6,*現(xiàn)貨供應(yīng)* 97-59-6
CAS:1404-19-9,寡霉素現(xiàn)貨供應(yīng)寡霉素1404-19-9
CAS:20559-55-1,丙氧咪唑現(xiàn)貨供應(yīng)丙氧咪唑20559-55-1
CAS:65141-46-0,*現(xiàn)貨供應(yīng)*65141-46-0
CAS:67-20-9,大顆粒* 現(xiàn)貨供應(yīng)大顆粒* 67-20-9
CAS:59-30-3,*類現(xiàn)貨供應(yīng)*類59-30-3
CAS:76801-85-9,*現(xiàn)貨供應(yīng)*76801-85-9
CAS:82159-09-9,* 現(xiàn)貨供應(yīng)* 82159-09-9
CAS:192569-17-8,11-alpha-羥基坎利酮 現(xiàn)貨供應(yīng)11-alpha-羥基坎利酮 192569-17-8
CAS:979-02-2,雙烯醇酮醋酸酯現(xiàn)貨供應(yīng)雙烯醇酮醋酸酯979-02-2
CAS:6554-10-5,5'-O-三苯甲基-尿苷現(xiàn)貨供應(yīng)5'-O-三苯甲基-尿苷6554-10-5
CAS:13171-25-0,*現(xiàn)貨供應(yīng)*13171-25-0
CAS:5743-27-1,*鈣現(xiàn)貨供應(yīng)*鈣5743-27-1
CAS:79559-97-0,*現(xiàn)貨供應(yīng)*79559-97-0
CAS:53-16-7,雌酚酮 現(xiàn)貨供應(yīng)雌酚酮 53-16-7
CAS:154361-50-9,卡培他賓 現(xiàn)貨供應(yīng)卡培他賓 154361-50-9
CAS:532-43-4,*1--*現(xiàn)貨供應(yīng)*1--*532-43-4
CAS:1264-72-8,硫酸粘桿菌素現(xiàn)貨供應(yīng)硫酸粘桿菌素1264-72-8
CAS:203060-53-3,Daptomycin現(xiàn)貨供應(yīng)Daptomycin203060-53-3
CAS:5571-36-8,縮酮物現(xiàn)貨供應(yīng)縮酮物5571-36-8
CAS:1037-50-9,*鈉現(xiàn)貨供應(yīng)*鈉1037-50-9
CAS:105-16-8,甲基丙烯酸二乙氨基乙酯/DEAEMA現(xiàn)貨供應(yīng)甲基丙烯酸二乙氨基乙酯/DEAEMA105-16-8
CAS:106560-14-9,* 磺胺類現(xiàn)貨供應(yīng)* 磺胺類106560-14-9
CAS:32543-38-7,混旋肉堿乳清酸鹽現(xiàn)貨供應(yīng)混旋肉堿乳清酸鹽32543-38-7
CAS:6381-77-7,異vc鈉（異抗壞血酸鈉）類現(xiàn)貨供應(yīng)異vc鈉（異抗壞血酸鈉）類6381-77-7
CAS:33564-30-6,*現(xiàn)貨供應(yīng)*33564-30-6
CAS:6153-64-6,*現(xiàn)貨供應(yīng)*6153-64-6
CAS:22161-81-5,右*現(xiàn)貨供應(yīng)右*22161-81-5
CAS:566-48-3,福美斯坦現(xiàn)貨供應(yīng)福美斯坦566-48-3
CAS:15318-45-3,*現(xiàn)貨供應(yīng)*15318-45-3
CAS:32986-56-4,*現(xiàn)貨供應(yīng)*32986-56-4
CAS:114977-28-5,*現(xiàn)貨供應(yīng)*114977-28-5
CAS:26787-78-0,*現(xiàn)貨供應(yīng)*26787-78-0
CAS:532-03-6,*現(xiàn)貨供應(yīng)*532-03-6
CAS:50-24-8,*龍現(xiàn)貨供應(yīng)*龍50-24-8
CAS:43210-67-9,芬苯達(dá)唑現(xiàn)貨供應(yīng)芬苯達(dá)唑43210-67-9
CAS:61379-65-5,*現(xiàn)貨供應(yīng)*61379-65-5
CAS:1190307-88-0,索非布韋現(xiàn)貨供應(yīng)索非布韋1190307-88-0
CAS:16837-52-8,*現(xiàn)貨供應(yīng)*16837-52-8
CAS:83-43-2,* 現(xiàn)貨供應(yīng)* 83-43-2
CAS:503612-47-3,阿哌沙班現(xiàn)貨供應(yīng)阿哌沙班503612-47-3
CAS:51481-61-9,*現(xiàn)貨供應(yīng)*51481-61-9
CAS:81-13-0,D-泛醇 現(xiàn)貨供應(yīng)D-泛醇 81-13-0
CAS:124665-09-0,心血管原料藥K5現(xiàn)貨供應(yīng)心血管原料藥K5124665-09-0
CAS:180200-66-2,*現(xiàn)貨供應(yīng)*180200-66-2
CAS:75330-75-5,洛伐司他汀現(xiàn)貨供應(yīng)洛伐司他汀75330-75-5
CAS:138112-76-2,* 現(xiàn)貨供應(yīng)* 138112-76-2

環(huán)保在線 設(shè)計(jì)制作，未經(jīng)允許翻錄必究 .? ? ? Copyright(C)?2021 http://www.niunang.cn,All rights reserved.

以上信息由企業(yè)自行提供，信息內(nèi)容的真實(shí)性、準(zhǔn)確性和合法性由相關(guān)企業(yè)負(fù)責(zé)，環(huán)保在線對(duì)此不承擔(dān)任何保證責(zé)任。 溫馨提示：為規(guī)避購(gòu)買風(fēng)險(xiǎn)，建議您在購(gòu)買產(chǎn)品前務(wù)必確認(rèn)供應(yīng)商資質(zhì)及產(chǎn)品質(zhì)量。

會(huì)員登錄

×

請(qǐng)輸入賬號(hào)

請(qǐng)輸入密碼

=

請(qǐng)輸驗(yàn)證碼

收藏該商鋪

請(qǐng) 登錄 后再收藏

提示

您的留言已提交成功！我們將在第一時(shí)間回復(fù)您~
看小伙草白女人比的黄片| 午夜国产三级一区二区三| 使劲操大骚逼av| 成人毛片一级特黄| 久久一级高潮a免费| 青青操成人版性视频| 操美女逼逼色逼网| 日本免费精品一区二区三区四区| 男人几把操女人嫩穴| 九九在线视频热线视频精选| 国产精品一区二区在线观看91| 被公侵犯人妻少妇一区二区三区| 爆乳喷奶水无码正在播放| 精品久久av免费一区二区三区| 2021国产精品自在自线| 日韩 中文字幕在线最新| 国产在线中文字幕一区二区三区| 欧美一区二区三区四区五区精品| 骚逼被狂插视频教程| 乱伦美女小骚货视频| 黑大吊肏小騷逼噴水| 欧美日韩欧美国产中文字幕| 日本亚洲欧洲一区二区| 日韩精品一区二区天堂| 视频一区视频二区制服丝袜| 大黑屌日本另类肛交| 午夜理论理论亚洲激情| 西瓜在线看免费观看视频| 公交车上被后入搞逼漫画| 黑人大吊性交啪啪啪| 免费看看小骚逼逼| 亚洲成国产人片在线观看| 泰国无码AV片在线观看| 亚洲欧洲精品无码久久久| 亚洲精品影片一区二区三区| 99热这里只有精品98| 男插女下面高潮视频| 国产亚洲一区二区手机在线观看| 尤物AV无码国产在线看| 麻豆视频一级片在线观看| 冷色系的发色有哪些颜色|