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關(guān)于elisa試劑盒在實驗中種屬通用操作步驟的說明

時間:2013-12-9閱讀:1611
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Elisa試驗是一種敏感性高,特異性強(qiáng),重復(fù)性好的實驗診斷方法。由于其試劑穩(wěn)定、易保存,操作簡便,結(jié)果判斷較客觀等因素,已廣泛應(yīng)用在免疫學(xué)檢驗的各領(lǐng)域中。ELISA試劑盒是用于體外定性檢測人血清或血漿中的抗人類戊型肝炎(HEV)病毒 IgM 抗體ELISA檢測。我司所售elisa試劑盒的種屬繁多,大鼠,小鼠,人,豚鼠,雞,豬類各種elisa試劑盒*,公司統(tǒng)一規(guī)格為48T,96T,人ELISA 試劑盒的操作步驟也不盡相同,以下為具體操作步驟分享:

ELISA試劑盒操作步驟(通用):

1. 加標(biāo)準(zhǔn)品:在酶標(biāo)包被板上設(shè)標(biāo)準(zhǔn)品孔,ELISA試劑盒 依次加入不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)品50ul(建議每個濃度做2個平行孔)人ELISA試劑盒。

2. 加樣:分別設(shè)空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑,其余各步操作相同)、待測樣品孔。大鼠ELISA試劑盒在酶標(biāo)包被板上待測樣品孔中先加樣品40μl,然后再加樣品親和素10μl。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻人ELISA試劑盒。

3. 溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘ELISA試劑盒。

4. 配液:將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用。

5. 洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,大鼠ELISA試劑盒每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復(fù)5次,拍干小鼠ELISA試劑盒。

6. 加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑50μl,空白孔除外ELISA試劑盒。

7. 溫育:操作同3。

8. 洗滌:操作同5。

9. 顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘人ELISA試劑盒.

10. 終止:每孔加終止液50μl,ELISA試劑盒終止反應(yīng)(此時藍(lán)色立轉(zhuǎn))。

測定:以空白空調(diào)零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)。 測定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進(jìn)行。

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