摘要：生物安全柜已經(jīng)廣泛應(yīng)用于生物、病毒實(shí)驗(yàn)等高危場合的操作，也是藥廠中常用的一種防護(hù)設(shè)備。 在應(yīng)用中除了要正確的選型以及安裝使用外，為了保證防護(hù)安全性，按照《生物安全柜》YY0569-2005 標(biāo) 準(zhǔn)還需要每年對其進(jìn)行維護(hù)和安全驗(yàn)證性檢驗(yàn)至少一次，其中過濾器的完整性檢漏實(shí)驗(yàn)是其中一項主 要檢測內(nèi)容。當(dāng)生物安全柜移動位置后或者更換過濾器以及內(nèi)部的部件進(jìn)行維修后，也需要重新進(jìn)行維護(hù) 后過濾器安全性檢驗(yàn)。本文討論的主要就是藥廠生物安全柜過濾器檢漏及安全驗(yàn)證的現(xiàn)場檢測方 法以及期間需要注意的問題及解決方法。

1.  引言
生物安全柜就是一種負(fù)壓過濾排風(fēng)柜，其目的 是為了防止操作者和環(huán)境暴露于實(shí)驗(yàn)過程中產(chǎn)生的生物氣溶膠，是藥廠中常用的一種防護(hù)設(shè)備。我國相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)《生物安全柜》YY0569-2005[1]、美國生物安全柜 NSF/ANSI 49-2008[2]標(biāo)準(zhǔn)以及歐盟生物安 全柜統(tǒng)一標(biāo)準(zhǔn) EN12469：2000[3]都對生物安全柜的性能檢測做出了明確的規(guī)定。其中對于過濾器 安裝前后的完整性進(jìn)行測試是*的一項內(nèi)容，也是獲得 ASTM、ISPE、FDA 以及 EU 認(rèn)可并且 目前在上通行的做法[4]。同時也是確保生物安全柜能夠安全使用的一個重要性能和檢測過程中 常見的問題，需要操作使用者高度關(guān)注。世界衛(wèi)生組織（WHO）在其頒布的實(shí)驗(yàn)室生物 安全手冊中要求用戶選擇正確類型的生物安全柜，進(jìn)行正確的安裝使用，并且每年都要進(jìn)行認(rèn)證。 YY0569 標(biāo)準(zhǔn)要求生物安全柜的維護(hù)和檢驗(yàn)每年至少一次，當(dāng)生物安全柜移動位置后或者更換過濾器 以及內(nèi)部的部件進(jìn)行維修后，也需要重新進(jìn)行維護(hù)檢驗(yàn)[1]。由此可見生物安全柜的檢測是相當(dāng)重要也 相當(dāng)有必要的，本文將結(jié)合具體實(shí)例來重點(diǎn)介紹生物安全柜的現(xiàn)場測試方法及注意事項。

2. 過濾器完整性測試儀器和現(xiàn)場檢測方法
2.1 測試儀器
（1）TDA-6C 氣溶膠發(fā)生器
利用內(nèi)置的壓縮氣 源在液體中鼓氣泡，通過 2~6 個 Laskin Nozzles飛濺產(chǎn)生物態(tài)的多分散相 PAO 或者 DOP 氣溶膠（本 文采用的氣 溶膠是 PAO）。其發(fā)塵 濃度范圍為10~100μg/L，粒子粒徑主要集中在 0.25~3.0μm 之間。
（2）TDA-2H 氣溶膠光度計
氣溶膠濃度測量范 圍：0.0001~125μg/L。度：滿量程的 1%。重復(fù)性：滿量程的 0.05%。 
2.2 現(xiàn)場檢測方法
在進(jìn)行檢測之前首先對生物安全柜的結(jié)構(gòu)進(jìn) 行一下說明，以Ⅱ級生物安全柜為例，圖一顯示了Ⅱ級生物安全柜的一般結(jié)構(gòu)形式，由柜體、前窗、 操作臺、檢測孔、發(fā)塵口、循環(huán)風(fēng)機(jī)以及過濾器組成，過濾器按照用途來說從上往下依次為 排風(fēng)過濾器、循環(huán)風(fēng)過濾器以及進(jìn)風(fēng)過濾器。過濾器級別均為 H14，效率可以達(dá)到 99.994%以上，按照 YY0569 標(biāo)準(zhǔn)要求需要對它們做安全檢漏實(shí)驗(yàn)。前窗可以上下開啟，操作者可以通 過開啟的前窗在安全柜內(nèi)的操作臺上進(jìn)行操作，在操作空間內(nèi)還可以看到左右兩側(cè)各有兩個用于檢 測特意設(shè)置的檢測口，分別為發(fā)塵口和檢測孔。
二為生物安全柜的運(yùn)行原理圖，有為了保護(hù)操作者 維持工作區(qū)域內(nèi)負(fù)壓所需的新風(fēng)以及用于保護(hù)產(chǎn) 品所需的凈化循環(huán)風(fēng)，以及為了保護(hù)周圍環(huán)境不受 污染經(jīng)過過濾器凈化排出的排風(fēng)。其循環(huán)由位 于生物安全柜內(nèi)的循環(huán)風(fēng)機(jī)來維持。 在對生物安全柜排風(fēng)過濾器以及循環(huán)風(fēng) 過濾器進(jìn)行測試前，要去掉過濾器的保護(hù)蓋和散流裝置，打開生物安全柜的風(fēng)機(jī)和燈。將氣溶膠發(fā)生 器放置在固定位置，把發(fā)塵管放在生產(chǎn)廠家設(shè)置的 發(fā)塵口位置（見圖 1），開啟氣溶膠發(fā)生器使得產(chǎn) 生的氣溶膠進(jìn)入生物安全柜，令氣溶膠均勻分布在 過濾器的上游氣流。如果廠商沒有明確設(shè)置氣 溶膠的導(dǎo)入位置，那么就需要確保氣溶膠導(dǎo)入的方 式能夠在安全柜氣流中充分混合[1] 。

測試上游氣溶膠濃度：打開氣溶膠光度計，將 氣溶膠光度計的檢測管插在生物安全柜的檢測孔位置（見圖 1），檢測孔通過管道與風(fēng)機(jī)出口后的回風(fēng)艙相通，可以對過濾器前與氣溶膠充分混 合好的上游氣流進(jìn)行采樣，要使位于上游的氣溶膠 濃度不小于 10μg/L。利用光度計探頭在過濾器下游距離過濾器表面不超過 25mm 的位置，以低于 50mm/s 的掃描速度移動，確保探頭掃描到過濾器的整個下游位置以及每個過濾片的邊緣，掃描的路線 應(yīng)該稍稍重疊。圍繞整個過濾器外圍、沿組合過濾片和框架的連接處以及圍繞過濾器和其他部件之間的密封處要仔細(xì)檢查（見圖 3）[5]。 進(jìn)風(fēng)過濾器的現(xiàn)場檢測方法：接著上述實(shí)驗(yàn)，
關(guān)掉氣溶膠發(fā)生器，將插在發(fā)塵口位置的發(fā)塵管拔出并將發(fā)塵口用密封膠圈密封，并且將氣溶膠光度 計上游濃度設(shè)置成測量排風(fēng)和循環(huán)風(fēng)過濾器 時候的上游氣溶膠濃度，然后撥到下游位置測量下游位置氣溶膠濃度。重新開啟氣溶膠發(fā)生器，將發(fā) 塵管對著進(jìn)風(fēng)過濾器發(fā)塵，以大約 50mm/s 的速度均勻移動，確保發(fā)塵能夠覆蓋整個進(jìn)風(fēng)過 濾器以及其外圍和框架的連接處。
對于經(jīng)排風(fēng)過濾器過濾并通過管道排氣的生 物安全柜，不能進(jìn)行排氣過濾器的掃描檢測，這種 情況測試過濾器的全效率以確定其完整性。下游氣流中氣溶膠濃度的檢測在下游氣流的管道上鉆出 一個直徑大約 10mm 的孔（見圖四），將帶有硬質(zhì) 光度計探針插入孔中進(jìn)行檢測[6]。