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技術(shù)文章

酶標記熒光信號放大技術(shù)在ISH中的應(yīng)用

閱讀:1389發(fā)布時間:2011-3-28

多種實驗結(jié)果已證實,該技術(shù)具有很高的敏感性,但是如掌握不好也可帶來很高的背景染色,可有多種因素影響到zui終產(chǎn)物在酶結(jié)合位點的沉積,這是因為這個沉積過程是一種復(fù)雜的化學反應(yīng)和物理變化的綜合結(jié)果。Breininger等(2000)認為,在ELF的反應(yīng)過程中很容易形成假的熒光結(jié)晶,使FISH信號減弱,引起非特異性結(jié)晶沉積在組織細胞表面,造成背景信號。

實驗結(jié)果證實,只要延長ELF反應(yīng)時間,就可以避免背景染色。

解決的辦法主要有:
①商品化試劑盒內(nèi)提供一種延時試劑;
②在顯色液中加入4%PVP;
③顯色時間控制在15~30min內(nèi)。
 


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