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技術(shù)文章

含醛基或酮基的小分子蛋白的交聯(lián)

閱讀：566發(fā)布時(shí)間：2011-11-5


通過鄰羧甲基肟[o—（carboxymethyl）oximes]的形成，羧基很容易引入到酮基和醛基上。酮基也可用對(duì)肼苯甲酸（p—hydrazinobenzoicacid）衍生產(chǎn)生羧基，然后即可通過前面所述的方法結(jié)合于蛋白載體上。含醛基的小分子亦可通過形成schiff堿（其可用NaBH，還原而穩(wěn)定）而直接結(jié)合于蛋白分子上。

目的：耦聯(lián)蛋白與含酮基小分子。

操作步驟：
（1）溶解10 mmol／I鄰羧甲基羥胺[。—（carboxymethyl）hydroxylamine][商品名亦稱（aminooxy）aceticacid或羧甲基胺（carboxymethyoxylamine）]和4 mmol／L含酮基小分子于200 m1乙醇和20 m1 5％NaOH混合液中；
（2）加熱回流90min；
（3）通過旋轉(zhuǎn)薄膜蒸發(fā)減少體積，加水至40m1，用乙醚抽提；
（4）用水洗乙醚抽提物，干燥，得到干白粉產(chǎn)物。
 


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