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技術(shù)文章

捕獲法ELISA檢測(cè)HBsAg/C3-CIC

閱讀：838發(fā)布時(shí)間：2012-2-2

抗原／C3是所有激活補(bǔ)體的抗原類CIC的總和，如以抗C3為包被抗體，則對(duì)探討某類抗原特異性IC的病理作用具有重要意義?，F(xiàn)將捕獲法ELISA檢測(cè)HBsAg/C3—CIC介紹如下：

在聚苯乙烯微量反應(yīng)板內(nèi)加入抗人C3的羊IgG，0．1ml/孔(10ug/mL)，4℃作用24h。用PBST洗滌3次；加入0．1mL用生理鹽水按l：10稀釋的待檢血清，每份標(biāo)本2復(fù)孔，同時(shí)設(shè)陰、陽性對(duì)照，置4cC24h。同上洗滌，加0．1mLHRP-抗HBs(用含10％羊血清的PBST稀釋)，25℃作用4ho同上洗滌，加0．1mL新鮮配制的OPD-H202底物溶液，25℃反應(yīng)15min；加0．05mL2mol／LH2S04終止反應(yīng)。用酶標(biāo)儀測(cè)492nmOD值，根據(jù)2復(fù)孔的OD值，以P／N值大于或等于2．1者判斷為HBsAg／C3-CIC陽性。

臨床意義：HBsAg／C3-CIC陽性率與肝損傷嚴(yán)重程度明顯相關(guān)，表明其可能在HBV引起慢性活動(dòng)性肝炎、重癥肝炎和肝炎后肝硬化的發(fā)病過程中起重要作用。在慢性肝病患者中，HBeAg陽性者，HBsAs/C3-CIC的檢出率顯著高于HBeAg陰性者；在聚合人白蛋白受體(PHSAR)陽性者中檢出率亦顯著高于PHSAR陰性者。而急性乙肝的HBsAg／C3-CIC在HBV感染的急、慢性肝病中具有不同的病理生理意義。


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