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補(bǔ)體遺傳多態(tài)性的檢測(cè)

閱讀：503發(fā)布時(shí)間：2012-2-25

補(bǔ)體遺傳多態(tài)性的檢測(cè)大多分二步進(jìn)行，*步是用瓊脂糖高壓電泳或聚丙烯酰胺等電聚焦電泳將EDTA抗凝血漿通過(guò)凝膠電泳，根據(jù)分子量的大小、所帶電荷的多少及等電點(diǎn)（p1）將血漿蛋白分開(kāi)。第二步是免疫固定或溶血鑒定，瓊脂糖高壓電泳或聚丙烯酰胺等電聚焦后，在凝膠板上鋪上抗補(bǔ)體某一成分的抗血清，使其與凝膠板上的抗原結(jié)合，形成分子量較大的免疫復(fù)合物沉淀嵌在凝膠孔中，不易漂洗掉，故稱免疫固定。將免疫固定后的凝膠板在生理鹽水中漂洗，除去其他蛋白成分?？靖桑捡R斯亮藍(lán)染色。

依照第六屆補(bǔ)體定型會(huì)議標(biāo)準(zhǔn)或標(biāo)準(zhǔn)品，判斷待測(cè)樣本補(bǔ)體的同種異型?；蛴萌苎▽⒅旅鬝RBC和缺乏某一補(bǔ)體成分的豚鼠血清或人血清混合，傾倒在電泳完畢的凝膠板上，凝膠板上的待測(cè)補(bǔ)體成分使缺乏的補(bǔ)體成分得以補(bǔ)償，酶反應(yīng)發(fā)生，導(dǎo)致溶血反應(yīng)，凝膠板上可出現(xiàn)待測(cè)樣本補(bǔ)體某一成分的溶血帶。

補(bǔ)體C4有兩個(gè)基因座位，分別為C4A、C4B，兩者均表現(xiàn)高度的遺傳多態(tài)性，現(xiàn)已發(fā)現(xiàn)30余種同種異型。C4遺傳多態(tài)性在人類淵源、法醫(yī)鑒定及與疾病相關(guān)的研究領(lǐng)域受到極大的重視。C4遺傳多態(tài)性的檢測(cè)方法可分兩種，一種是瓊脂糖高壓電泳加免疫固定，另一種是瓊脂糖高壓電泳后加溶血覆蓋。在有抗血清的情況下，使用前者簡(jiǎn)單、方便、易行。僅在C4兩個(gè)基因座位不易辨別時(shí)才采用后者。


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