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規(guī)格	5×105Cells/T25培養(yǎng)瓶	組織來(lái)源	血液組織
貨號(hào)	CS-X3401	細(xì)胞形態(tài)	圓形

細(xì)胞保存方法：

（一）細(xì)胞凍存

1. 配制含10%DMSO或甘油、10～20%小牛血清的凍存培養(yǎng)液；

2. 取對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的細(xì)胞，去除舊培養(yǎng)液，用PBS清洗。

3. 去除PBS，加入適量（覆蓋培養(yǎng)皿表面）把單層生長(zhǎng)的細(xì)胞消化下來(lái)；

4. 離心1000rpm，5min；

5. 去除，加入適量配制好的凍存培養(yǎng)液，用吸管輕輕吹打使細(xì)胞均勻，計(jì)數(shù)，調(diào)節(jié)凍存液中細(xì)胞的最終密度為5×106/ml～1×107/ml；

6. 將細(xì)胞分裝入凍存管中，每管1～1.5 ml；

7. 在凍存管上標(biāo)明細(xì)胞的名稱(chēng)，凍存時(shí)間及操作者；

8. 凍存：標(biāo)準(zhǔn)的凍存程序?yàn)榻禍厮俾?1～-2℃/ min；當(dāng)溫度達(dá)-25℃以下時(shí)，可增至-5℃～-10℃/min；到-100℃時(shí)，則可迅速浸入液氮中。也可將裝有細(xì)胞的凍存管放入-20℃冰箱2h ，然后放入-70℃冰箱中過(guò)夜，取出凍存管，移入液氮容器內(nèi)。

產(chǎn)品信息：

貨號(hào)	CS-X3401	組織來(lái)源	血液組織
傳代特性	不增殖；不傳代	培養(yǎng)基	含FBS、生長(zhǎng)添加劑、Penicillin、Streptomycin等
細(xì)胞形態(tài)	圓形	生長(zhǎng)特性	懸浮
培養(yǎng)條件	氣相：空氣，95%；CO2，5%	換液頻率	每2-3天換液一次

商品介紹：

產(chǎn)品名稱(chēng)：大鼠外周血淋巴細(xì)胞
2.組織來(lái)源：血液組織

3.產(chǎn)品規(guī)格：5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶

4.細(xì)胞簡(jiǎn)介：

大鼠外周血淋巴細(xì)胞分離自外周血；外周血是除骨髓之外的血液，臨床上常用一些方法把骨髓中的造血干細(xì)胞釋放到血液中，再在從血液中提取分離得到造血干細(xì)胞，我們把這樣得到的干細(xì)胞稱(chēng)為外周血干細(xì)胞，在二十一世紀(jì)初人類(lèi)開(kāi)始的生命方舟計(jì)劃中提出外周血這一新概念。淋巴細(xì)胞（lymphocyte）是白細(xì)胞的一種，是體積小的白細(xì)胞。其由淋巴器官產(chǎn)生，主要存在于淋巴管中循環(huán)的淋巴液中，是機(jī)體免疫應(yīng)答功能的重要細(xì)胞成分，是淋巴系統(tǒng)幾乎全部免疫功能的主要執(zhí)行者，是對(duì)抗外界感染和監(jiān)控體內(nèi)細(xì)胞變異的一線“士兵"。淋巴細(xì)胞是一類(lèi)具有免疫識(shí)別功能的細(xì)胞系，按其發(fā)生遷移、表面分子和功能的不同，可分為T(mén)淋巴細(xì)胞（又名T細(xì)胞）、B淋巴細(xì)胞（又名B細(xì)胞）和自然殺傷（NK）細(xì)胞。T細(xì)胞和B細(xì)胞都是抗原特異性淋巴細(xì)胞，它們的初來(lái)源是相同的，都來(lái)自造血組織。T淋巴細(xì)胞隨血循環(huán)到胸腺，在胸腺激素等的作用下成熟，而B(niǎo)細(xì)胞在骨髓中分化成熟。當(dāng)受抗原刺激后，T淋巴細(xì)胞即轉(zhuǎn)化為淋巴母細(xì)胞，再分化為致敏T淋巴細(xì)胞，參與細(xì)胞免疫，其免疫功能主要是抗胞內(nèi)感染、瘤細(xì)胞與異體細(xì)胞等；而B(niǎo)淋巴細(xì)胞是先轉(zhuǎn)化為漿母細(xì)胞，再分化為漿細(xì)胞，產(chǎn)生并分泌免疫球蛋白（抗體），參與體液免疫，其功能是產(chǎn)生抗體，提呈抗原，以及分泌細(xì)胞內(nèi)因子參與免疫調(diào)節(jié)；NK細(xì)胞不依賴(lài)抗原刺激而自發(fā)地發(fā)揮細(xì)胞毒效應(yīng)，具有殺傷靶細(xì)胞的作用。

5.方法簡(jiǎn)介：

公司實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠外周血淋巴細(xì)胞采用取外周血、通過(guò)密度梯度離心法制備而來(lái)制備而來(lái)，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。

6.質(zhì)量檢測(cè)：

公司實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠外周血淋巴細(xì)胞經(jīng)過(guò)檢測(cè)，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

7.培養(yǎng)信息：

培養(yǎng)基含FBS、生長(zhǎng)添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率每2-3天換液一次

生長(zhǎng)特性懸浮

細(xì)胞形態(tài) 圓形

傳代特性不增殖；不傳代

消化液 0.25%yi蛋白酶

培養(yǎng)條件氣相：空氣，95%；CO2，5%

大鼠外周血淋巴細(xì)胞

操作步驟：

1）、冷凍前24-48小時(shí)更換半量或全量培養(yǎng)基，使細(xì)胞處于指數(shù)生長(zhǎng)期。

2）、配制冷凍保存溶液(使用前配制)：另取一離心管，加入培養(yǎng)基、血清，逐滴加入二甲基亞砜 (DMSO)至20%濃度，即制成雙倍的凍存液，置于室溫下待用。

3）、離心收集培養(yǎng)之細(xì)胞，用加血清的培養(yǎng)基重懸起細(xì)胞，取少量細(xì)胞懸浮液(約0. 1 ml)計(jì)數(shù)細(xì)胞濃度及凍前存活率。

4）、取與細(xì)胞懸液等量的凍存液，緩慢逐滴加入細(xì)胞懸液，并晃動(dòng)試管，制成細(xì)胞凍存懸液(DMSO后濃度為5～10%)，使細(xì)胞濃度為1～5×106cells/ ml，混合均勻，分裝于已標(biāo)示之冷凍保存管中，1～2 ml/vial，并取少量細(xì)胞懸浮液作污染檢測(cè)。嚴(yán)密封口后，注明細(xì)胞名稱(chēng)、代數(shù)、日期。然后進(jìn)行凍存。

注意事項(xiàng)：

1）、欲冷凍保存之細(xì)胞應(yīng)在生長(zhǎng)良好且存活率高之狀態(tài)，約為80～90%致密度。冷凍前檢測(cè)細(xì)胞是否仍保有其性質(zhì)，應(yīng)在冷凍保存前一至二日測(cè)試是否有抗體之產(chǎn)生。

2）、細(xì)胞在液氮中可長(zhǎng)期凍存無(wú)，而不會(huì)影響細(xì)胞活力;在-70度可保存數(shù)月。

3）、注意冷凍保護(hù)劑之品質(zhì)。DMSO應(yīng)為試劑級(jí)等級(jí)，無(wú)菌且無(wú)色(以0. 22micron FGLP Telflon過(guò)濾或是直接購(gòu)買(mǎi)無(wú)菌產(chǎn)品，如Sigma D-2650)，以5～10 ml小體積分裝，4 ℃避光保存，勿作多次解凍。Glycerol亦應(yīng)為試劑級(jí)等級(jí)，以高壓蒸汽滅菌后避光保存。在開(kāi)啟后一年內(nèi)使用，因長(zhǎng)期儲(chǔ)存后對(duì)細(xì)胞會(huì)有毒性。本方法中先制備雙倍凍存液，可避免DMSO直接加入時(shí)釋放的熱量對(duì)細(xì)胞的損傷。緩慢逐滴加入細(xì)胞懸液是使細(xì)胞逐步適應(yīng)高滲，可降低細(xì)胞受損。DMSO可能引起部分白血病細(xì)胞株的分化，可換用10%甘油凍存。

公司正在出售的產(chǎn)品：

769-P (人腎細(xì)胞腺癌細(xì)胞)	人補(bǔ)體因子H(CFH)試劑盒ELISA
人骨髓來(lái)源內(nèi)皮祖細(xì)胞	人抗抗體(AsAb)試劑盒elisa
人骨髓樹(shù)突狀細(xì)胞(DC細(xì)胞)	人γ分泌su激活蛋白(PION)檢測(cè)試劑盒
人關(guān)節(jié)軟骨細(xì)胞	人白喉抗體(Diphtheria Ab)試劑盒 ELISA
人冠狀動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞	斑點(diǎn)病密螺旋體PCR試劑盒
人冠狀動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞	溶組織內(nèi)阿米巴PCR檢測(cè)試劑盒
人呼吸道上皮細(xì)胞	植物內(nèi)源基因tRNA-Leu核suan檢測(cè)試劑盒
人滑膜成纖維細(xì)胞	?？蒲?/span>PCR檢測(cè)試劑盒
人滑膜細(xì)胞	蜜蜂球囊菌PCR試劑盒
人甲狀腺癌組織源細(xì)胞	瘧原蟲(chóng)通用PCR試劑盒
人甲狀腺濾泡上皮細(xì)胞	牛細(xì)小病毒（BPV）核suan檢測(cè)試劑盒
人角膜成纖維細(xì)胞	綿羊腺病毒PCR檢測(cè)試劑盒
人膠質(zhì)瘤組織源細(xì)胞	大鼠外周血淋巴細(xì)胞綿羊鞭蟲(chóng)PCR檢測(cè)試劑盒
人角膜基質(zhì)細(xì)胞	牛腎盂腎炎棒桿菌PCR檢測(cè)試劑盒
人角膜內(nèi)皮細(xì)胞	口蹄疫O型/A型/Asia型(FMDV-O/-A/-Asia)核suan檢測(cè)試劑盒