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轉(zhuǎn)膜實(shí)驗(yàn)原理與操作步驟2016/8/12
轉(zhuǎn)膜是把DNA從瓊脂糖凝膠中轉(zhuǎn)移到固相支持物(一般是尼龍膜)上固定,是進(jìn)行各種后續(xù)研究(如RFLP分析,陽性克隆的篩選驗(yàn)證等所有涉及分子雜交的研究)的前提。實(shí)驗(yàn)?zāi)康模赫莆誗outhernBlottin...
RNA瓊脂糖凝膠電泳實(shí)驗(yàn)原理、試劑配制方法及操作流2016/8/12
本實(shí)驗(yàn)的主要目的是掌握RNA瓊脂糖凝膠電泳的操作技術(shù),總結(jié)了RNARNA瓊脂糖凝膠電泳的原理、實(shí)驗(yàn)材料、試劑及器具、操作步驟及注意事項(xiàng)。一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康膶W(xué)習(xí)RNA瓊脂糖凝膠電泳的使用技術(shù)。二、實(shí)驗(yàn)原理RN...
細(xì)菌總DNA的提取和鑒定實(shí)驗(yàn)2016/8/11
【目的和要求】1.學(xué)會(huì)CTAB法提取細(xì)菌總DNA。2.掌握DNA的瓊脂糖凝膠電泳法?!緦?shí)驗(yàn)原理】DNA在生物體內(nèi)是與蛋白質(zhì)形成復(fù)合物的形式存在的,因此提取出脫氧核糖核蛋白復(fù)合物后,必須將其中蛋白質(zhì)去除...
端粒酶活性檢測(cè)操作必知2016/8/11
近幾年來端粒酶由于與長(zhǎng)壽、癌癥等的研究相關(guān)聯(lián)而備受關(guān)注,而端粒酶活性檢測(cè)具體方法又有那些呢?小編整理了端粒酶活性檢測(cè)的原理、基本操作技巧、結(jié)果判斷、擴(kuò)增片段檢測(cè)等方面內(nèi)容,以饗讀者。端粒酶(omera...
動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)中Hanks液、D-Hanks液和消化液的配制2016/8/10
hanks液可以維系細(xì)胞正常滲透壓與pH,本文主要記錄了動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)中Hanks液、D-Hanks液和消化液(胰酶液)的配制方法及其注意事項(xiàng)。動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng):hanks、D-Hanks液和消化液(胰酶液...
蛋白酶K的功能及使用方法2016/8/10
蛋白酶K,是一種切割活性較廣的絲氨酸蛋白酶。它切割脂族氨基酸和芳香族氨基酸的羧基端肽鍵。此酶經(jīng)純化去除了RNA酶和DNA酶活性。由于蛋白酶K在尿素和SDS中穩(wěn)定,還具有降解天然蛋白質(zhì)的能力,因而它應(yīng)用...
抗體的選用及應(yīng)用范圍2016/8/8
在臨床活檢工作中,對(duì)于各種腫瘤的正確判斷,歷來是外科病理學(xué)的核心問題。因它關(guān)系到患者的治療和預(yù)后的問題。在免疫組化技術(shù)沒開展以前,主要靠HE,特殊染色和組織化學(xué)來進(jìn)行鑒別和診斷各種腫瘤,這些在當(dāng)時(shí)雖然...
白介素2的特征與作用2016/8/8
白介素2(IL-2)分子量為1.5萬的糖蛋白,對(duì)T細(xì)胞激活及生長(zhǎng)有作用。IL-2主要由CD4+和CD8+T細(xì)胞產(chǎn)生,IL-2主要以自分泌或旁分泌方式發(fā)揮效應(yīng)。不同種屬間,IL-2沿種系譜向上有約束性,...
酶免疫細(xì)胞化學(xué)染色操作大全2016/8/5
一、材料和試劑1、玻片:須用免疫組化玻片,或用2%多聚賴氨酸包被處理玻片。2、5-10%正常山羊血清封閉液,用PBS配。3、3%牛血清白蛋白(BSA),用PBS配。4、0.01MpH7.4PBS5、1...
在ELISA實(shí)驗(yàn)技術(shù)中的抗原抗體反應(yīng)2016/8/5
1、抗體1.抗體的結(jié)構(gòu)抗體是能與抗原特異性結(jié)合的免疫球蛋白(immunoglobulin,Ig)。Ig分五類,即IgG、IgA、IgM、IgD和IgE。與免疫測(cè)定有關(guān)的Ig主要為IgG和IgM。Ig由...
ELISPOT與ELISA、有限稀釋法等5種檢測(cè)方法的區(qū)別2016/8/4
Elispot的歷史可以追溯到1963年Jerne等人創(chuàng)立的溶血空斑技術(shù)(hemo-lyticplaqueformingcellassay,HPF),這項(xiàng)技術(shù)可用于檢測(cè)并計(jì)數(shù)單個(gè)抗體形成細(xì)胞。隨著單克...
ELISA實(shí)驗(yàn)中緩沖溶液等試劑的配置2016/8/4
elisa實(shí)驗(yàn)中是以抗原和抗體的免疫反應(yīng)為基礎(chǔ),ELISA試劑以及各種溶液如何配置?zui近剛做了下ELISA實(shí)驗(yàn),把各種ELISA配置方法總?cè)缦拢?1)ELISA實(shí)驗(yàn)包被緩沖液(2)ELISA實(shí)驗(yàn)洗...
ELISA免疫標(biāo)記技術(shù)實(shí)驗(yàn)原理2016/8/3
免疫標(biāo)記技術(shù)是將一些既易測(cè)定又具有高度敏感性的物質(zhì)標(biāo)記到特異性抗原或抗體分子上,通過這些標(biāo)記物的增強(qiáng)放大效應(yīng)來顯示反應(yīng)系統(tǒng)中抗原或抗體的性質(zhì)與含量。常用的標(biāo)記物包括熒光素、酶和放射性核素等,用這3種標(biāo)...
免疫組化與抗原修復(fù)技術(shù)的應(yīng)用2016/8/3
福爾馬林固定時(shí),組織中的許多氨基酸殘基在分子內(nèi)或分子間形成了醛鍵,使得不少抗原決定簇被封閉。同時(shí),由于甲醛的聚合作用,使蛋白質(zhì)分子間相互交聯(lián)形成大分子網(wǎng)絡(luò),也導(dǎo)致了抗原決定簇被掩蓋,這就使得相當(dāng)部分的...
ELISA各環(huán)節(jié)中常見問題及解決方法2016/8/2
elisa試驗(yàn)以靈敏度較高、特異性較好的特點(diǎn)在臨床上得到了廣泛的應(yīng)用,但操作中的各個(gè)環(huán)節(jié)對(duì)試驗(yàn)的檢測(cè)效果影響較大,如不注意,有可能導(dǎo)致顯色不全、花板等結(jié)果?,F(xiàn)將操作中各個(gè)環(huán)節(jié)常出現(xiàn)問題的原因及解決辦法...

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