ELISA試劑盒試驗中常會遇到這些疑問：    
1. 溫育條件紛歧致，上海恒遠建議：恒溫箱溫育較水浴顯色深，OD值高出0.1-0.15，均選用恒溫箱。如用水浴水溫應控制在37℃。    
2. 樣品數量紛歧，加樣時刻長短紛歧。當重復某相同品時，加樣時刻盡可能與接近。    
考慮到有些客戶沒有試驗設備，我公司還能夠供給代測效勞，只需付試劑盒的費用，代測是免費的哦！
間接法 ：此測定方法與直接法類似，紛歧樣在于一級抗體沒有酶符號，改用酶符號的二級抗體去辨識一級抗體來測定抗原量。    
雙抗體夾心法 ：被檢查的抗原包被在兩個抗體之間，其間一個抗體將抗原固定于固相載體上，即捕捉抗體。
ELISA試劑盒另一個則是檢查抗體，此抗體可用酶符號后直接測定抗原的量；或不符號，再透過酶符號的二級抗體來測定抗原的量。
這兩種抗體有必要當心挑選，才可防止交互反應或競賽相同的抗原聯(lián)絡部位。        
競賽法：樣本里的抗原（安閑抗原）和純化并固定在固相載體上的抗原（固定抗原）一同競賽相同的抗體，當樣品里的安閑抗原越多，就能夠聯(lián)絡越多的抗體，而固定抗原就只能聯(lián)絡到較少的抗體，反之亦然。
經清洗進程，洗去安閑抗原和抗體的復合物，只留下固定抗原和抗體的復合物，拿來與只需固定抗原的對照組效果相比較，根據呈色差異就可計算出樣品里的抗原含量。
ELISA試劑盒直接法 ：將抗原直接固定在固相載體上，參加酶符號的一級抗體，即可測定抗原總量，此一級抗體的特異性非常重要。