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當(dāng)前位置:江蘇菲亞生物科技有限公司>>技術(shù)文章>>生物實驗中ELISA試劑盒的相關(guān)測定方法
Elisa試劑盒測定生物體內(nèi)各種微量有機物的方法大致可分為物理、化學(xué)、免疫學(xué)三類。在物理學(xué)分析方法中,主要借助于高精度的儀器設(shè)備,如紫外分光光度計、質(zhì)譜儀、氣相色譜儀和高壓液相色譜儀等。應(yīng)用這些儀器設(shè)備,雖然可以檢出體內(nèi)較微量的有機物(可檢出范圍在10-6mol/L~10-12mol/L間),但因操作復(fù)雜、費時,而且檢測成本較高,因此不利于在生產(chǎn)中推廣應(yīng)用。
Elisa試劑盒化學(xué)方法主要根據(jù)待測物與其他物質(zhì)的化學(xué)反應(yīng)、產(chǎn)生顏色變化來進行。該方法是zui早用于定量測定生物體內(nèi)微量有機物質(zhì)的基本方法。但因其檢出的靈敏度低(要求采樣很多)、特異性差,而且操作麻煩,因此也不利于推廣應(yīng)用。
RIA技術(shù)在靈敏度方面得到發(fā)展,可檢出生物體內(nèi)10-6mol/L~10-12mol/L濃度的超微量有機物。相對而言,RIA技術(shù)是這些免疫測定技術(shù)中較*的一種,因此評價Elisa試劑盒技術(shù)的優(yōu)缺點時,常以RIA技術(shù)做參照。
Elisa試劑盒RIA技術(shù)中用作指示劑的標(biāo)記物為放射性同位素,而檢測放射性同位素需要昂貴的儀器設(shè)備和輻射防護設(shè)備,并需有專門從事放射性同位素工作的實驗室和放射性廢物處理裝置,操作人員的健康常常受放射線照射的威脅。另外,就RIA質(zhì)量而言,盡管目前靈敏度已達pg/ml水平(即每毫克樣本中含被測物微微克),但不可能有太大的改進,因而其發(fā)展前景不大。此外,作為RIA指示劑的某些放射性同位素,由于半衰期短,因而限制了RIA試劑的保存時間。
Elisa試劑盒實驗室的有機廢水:在水污染源監(jiān)督檢測、總量監(jiān)測等工作中,實驗室分析所剩余的濃度較高的綜合有機廢水,有毒害,不能隨意傾倒,應(yīng)該集中在“綜合有機廢液桶”中,定期送附近廢水性質(zhì)相近并建有完善的廢水治理設(shè)施的工廠,和工廠廢水一并處理。
做好對照,正式試驗時,應(yīng)分別以陽性對照與陰性對照控制試驗條件,待檢樣品應(yīng)作一式二份,以保證實驗結(jié)果的準(zhǔn)確性。有時本底較高,說明有非特異性反應(yīng),可采用羊血清、兔血清或BSA等封閉。
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