洗滌在ELISA過(guò)程中雖不是一個(gè)反應(yīng)步驟，但卻也決定著實(shí)驗(yàn)的成敗。ELSIA就是靠洗滌來(lái)達(dá)到分離游離的和結(jié)合的酶標(biāo)記物的目的。

ELISA試劑盒洗滌液的使用原則：

1.某一項(xiàng)目的洗液建議使用該試劑盒內(nèi)的洗液；

2.同一elisa試劑盒洗液用完了，建議采用同一批號(hào)的洗液；

3.同一批號(hào)的洗液也用完了，建議采用同一項(xiàng)目的試劑洗液；

4.同一項(xiàng)目的洗液用完了，建議使用該項(xiàng)目其他廠家的洗液；

5.同一項(xiàng)目所有廠家都用完了，建議采用同一系列項(xiàng)目的洗液（比如甲乙丙丁戊庚肝抗體檢測(cè)，屬于肝炎系列，急用時(shí)可以暫時(shí)混用）；

6.不建議國(guó)產(chǎn)洗液與進(jìn)口洗液混用，也更不建議不同系列項(xiàng)目的洗液混用，這兩點(diǎn)都是因?yàn)橄匆旱呐渲贸煞植煌?，特別是不同項(xiàng)目的洗液（正規(guī)試劑廠家），主要組分都不太一樣。雖然對(duì)強(qiáng)陽(yáng)性標(biāo)本影響不是很大，但對(duì)于臨界陽(yáng)性陰性（灰區(qū)）標(biāo)本影響較大，所以不提倡不同系列項(xiàng)目洗液混用。

ELISA試劑盒的洗滌方式：

（1）浸泡式

a.吸干或甩干孔內(nèi)反應(yīng)液；

b.用洗滌液過(guò)洗一遍（將洗滌液注滿板孔后，即甩去）；

c.浸泡，即將洗滌液注滿板孔，放置1-2分鐘，間歇搖動(dòng)，浸泡時(shí)間不可隨意縮短；

d.吸干孔內(nèi)液體。吸干應(yīng)*，可用水泵或真空泵抽吸，也可甩去液體后在清潔毛巾或吸水紙上拍干；

e.重復(fù)操作c和d，洗滌3-4次（或按說(shuō)明規(guī)定）。在間接法中如本底較高，可增加洗滌次數(shù)或延長(zhǎng)浸泡時(shí)間。

（2）流水沖洗式

流水沖洗法zui初用于小珠載體的洗滌，洗滌液僅為蒸餾水甚至可用自來(lái)水。洗滌時(shí)附接一特殊裝置，使小珠在流水沖擊下不斷地滾動(dòng)淋洗，持續(xù)沖洗2分鐘后，吸干液體，再用蒸餾水浸泡2分鐘，吸干即可。浸泡式猶如盆浴，流水沖洗式則好比淋浴，其洗滌效果更為*，且也簡(jiǎn)便、快速。已有實(shí)驗(yàn)表明，流水沖洗式同樣也適用于微量滴定板的洗滌。洗滌時(shí)設(shè)法加大水流量或加大水壓，讓水流沖擊板孔表面，洗滌效果更佳。

    在ELISA操作中，洗滌是zui主要的關(guān)鍵技術(shù)，應(yīng)引起操作者的高度重視，操作者應(yīng)嚴(yán)格按要求洗滌，不得馬虎。