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什么是細(xì)胞株?什么是細(xì)胞系?如何購(gòu)買細(xì)胞株?

時(shí)間:2017/9/18閱讀:39717
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    細(xì)胞株(Cell Strain):通過(guò)選擇法或克隆形成法從原代培養(yǎng)物或細(xì)胞系中獲得具有特殊性質(zhì)或標(biāo)志物的培養(yǎng)物稱為細(xì)胞株(Cell Strain),也就是說(shuō),細(xì)胞株是用單細(xì)胞分離培養(yǎng)或通過(guò)篩選的方法,由單細(xì)胞增殖形成的細(xì)胞群。細(xì)胞株的特殊性質(zhì)或標(biāo)志必須在整個(gè)培養(yǎng)期間始終存在。 

    原代培養(yǎng)物經(jīng)傳代成功后即為細(xì)胞系(cell line), 由原先存在于原代培養(yǎng)物中的細(xì)胞世系所組成。如果不能繼續(xù)傳代,或傳代次數(shù)有限, 可稱為有限細(xì)胞系(finite cell line), 如可以連續(xù)培養(yǎng), 則稱為連續(xù)細(xì)胞系(continuous cell line), 培養(yǎng)50代以上并無(wú)限培養(yǎng)下去。 所以細(xì)胞株是通過(guò)選擇法或克隆形成法從原代培養(yǎng)物或細(xì)胞系中獲得的具有特殊性質(zhì)或標(biāo)志的培養(yǎng)細(xì)胞。從培養(yǎng)代數(shù)來(lái)講,可培養(yǎng)到40-50代。細(xì)胞株的特殊性質(zhì)或標(biāo)志必須在整個(gè)培養(yǎng)期間始終存在。如果不能繼續(xù)傳代或傳代數(shù)有限,稱為有限細(xì)胞株(finitecell strain);如果可以連續(xù)傳代,稱為連續(xù)細(xì)胞株(continuous cell strain)。對(duì)于人類腫瘤細(xì)胞,在體外培養(yǎng)半年以上,生長(zhǎng)穩(wěn)定的并連續(xù)傳代的即可稱為連續(xù)性株或系。

如何購(gòu)買細(xì)胞株? 

一、國(guó)內(nèi)細(xì)胞株選購(gòu)指南:

先打問(wèn)一下,所買的細(xì)胞是用的什么培養(yǎng)基以及什么血清,及早先準(zhǔn)備好。也用同樣的培養(yǎng)基。不要忘了問(wèn)一些培養(yǎng)所買細(xì)胞的一些生長(zhǎng)特性,包括大約多少天可以傳代等等吧。必要時(shí)所要所買細(xì)胞的一些技術(shù)資料。

二、由于現(xiàn)在國(guó)內(nèi)的細(xì)胞庫(kù)資料不是很足,再加上所做的實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目非常重要,有些客戶需要購(gòu)買國(guó)外細(xì)胞株,購(gòu)買國(guó)外細(xì)胞株需要考慮的因素有如下幾點(diǎn):

1、細(xì)胞株的生物等級(jí),由于有些細(xì)胞株及菌株屬于管制品,所以從國(guó)外購(gòu)貨比較麻煩。

2、在購(gòu)買國(guó)外細(xì)胞株時(shí),需交待國(guó)外加比較多的干冰(一般在13公斤以上,采用比較密封的泡沫盒加套紙箱。

3、報(bào)關(guān)時(shí)盡量提供比較充足的證明材料,以免擔(dān)擱時(shí)間而導(dǎo)致干冰揮發(fā)完細(xì)胞株死亡,甚至于被退回給發(fā)貨人。

4、如果通過(guò)國(guó)外細(xì)胞株在國(guó)內(nèi)的代理商購(gòu)買的話,合同中需注明以下一些內(nèi)容:

a.明確的到貨時(shí)間,這個(gè)時(shí)間需注明的是工作日,還是普通日。

b.采用什么樣的運(yùn)輸方法?

c.如果屬于技術(shù)外的因素而細(xì)胞株無(wú)法培養(yǎng)活,供方需負(fù)什么樣的責(zé)任?

d.細(xì)胞株的詳細(xì)資料,以及細(xì)胞株的代數(shù),其中,ATCC的細(xì)胞株一般都在幾十代,這個(gè)需要與國(guó)外確認(rèn),IST-Banca可與他們的代理商索取詳細(xì)資料!

e.需在合同中注明*,避免相關(guān)公司魚龍渾雜,從國(guó)外購(gòu)買回一株細(xì)胞株,經(jīng)過(guò)培養(yǎng)傳代后,同時(shí)供應(yīng)給幾個(gè)人;一般國(guó)外進(jìn)口的細(xì)胞株都會(huì)有原裝的凍存管,而且每一支凍存管上都會(huì)有批號(hào),而且每次的批號(hào)都不一樣。

f.在決定購(gòu)買細(xì)胞株之前,必須仔細(xì)閱讀他們的培養(yǎng)信息,所謂“細(xì)胞株未到,培養(yǎng)基先行一步”。

g.在接到細(xì)胞株后,要求供應(yīng)公司的人員現(xiàn)場(chǎng)參與,從而用于確認(rèn)責(zé)任。

h.在培養(yǎng)前,請(qǐng)確認(rèn)您的二氧化碳培養(yǎng)箱二氧化碳濃度的準(zhǔn)確性,國(guó)外的細(xì)胞株建議用進(jìn)口的細(xì)胞培養(yǎng)瓶,比如:orange,corning, falcon品牌的培養(yǎng)瓶。

i.詢問(wèn)你的代理商或者經(jīng)銷商,接到細(xì)胞株后是否需要離心置換出DMSO,因?yàn)橛行┘?xì)胞廠家建議不要離心,他們會(huì)認(rèn)為離心而導(dǎo)致的碎片比DMSO產(chǎn)生毒性的害處更大,如果可以離心,轉(zhuǎn)速不要過(guò)高,一般都在1000轉(zhuǎn)以下,此處需要注意,因?yàn)橛械墓緯?huì)拿這一點(diǎn)來(lái)拒絕索賠!

j.培養(yǎng)基的服務(wù),仔細(xì)與供應(yīng)商確認(rèn)培養(yǎng)基的品牌及份量,以免供應(yīng)商以些理由來(lái)推你索賠的理由。

k.在細(xì)胞株復(fù)蘇時(shí),一定要先想好步驟再做,一步一步來(lái)做,避免導(dǎo)致操作中的污染,復(fù)蘇是一個(gè)非常重要的步驟,往往容易導(dǎo)致污染,然后為污染所導(dǎo)致的雜質(zhì)而傷透腦筋。

 

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