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江蘇菲亞生物科學(xué)家鑒定凍存細胞的復(fù)蘇方法

時間:2018/6/26閱讀:969
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    細胞對凍存劑(DMSO或甘油)敏感,離心去除凍存培養(yǎng)基,然后加入*生長培養(yǎng)基中。江蘇菲亞生物的科學(xué)家們經(jīng)過多年的實驗研究鑒定凍存細胞的復(fù)蘇方法為:

 1)直接鋪板方法

取出貯存細胞,37℃水浴中快速融化。

直接用*生長培養(yǎng)基鋪板細胞。1 ml凍存細胞使用10~20 ml*生長培養(yǎng)基。進行活細胞計數(shù),細胞接種應(yīng)該至少在3×105活細胞/ml。

培養(yǎng)細胞1224小時,更換新鮮的*生長培養(yǎng)基,去除凍存劑。

 2)離心方法

取出貯存細胞,37℃水浴中快速融化。

12 ml凍存細胞加入到大約25 ml*生長培養(yǎng)基,輕輕混勻。

以大約80x g離心23分鐘。

棄去上清。

在*生長培養(yǎng)基輕輕再次懸浮細胞,并且進行活細胞計數(shù)。

細胞鋪板,細胞接種應(yīng)該至少為3×105活細胞/ml

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