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ELISA實(shí)驗(yàn)結(jié)果出現(xiàn)負(fù)值的原因分析

時(shí)間:2019/5/6閱讀:10721
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   客戶經(jīng)常會(huì)問(wèn)用兩個(gè)不同廠家的ELISA盒子測(cè)人血清中的TNF-α等指標(biāo)時(shí)都出現(xiàn)濃度負(fù)值, ,考慮是不是洗版太厲害了還是反應(yīng)溫度不夠,做第二遍的時(shí)候?qū)?shí)驗(yàn)方法,做了少許調(diào)整,將板置入36-37攝氏度的烘箱中反應(yīng),結(jié)果吸光度更低了,測(cè)的樣本的濃度仍然有很多負(fù)值,目前有兩個(gè)問(wèn)題:1、目前的負(fù)值數(shù)據(jù)該怎么處理?2、為什么會(huì)出現(xiàn)這樣的問(wèn)題?

菲亞技術(shù)答復(fù):血清中TNF-α值為負(fù)數(shù),可能有如下原因引起的:

、因?yàn)楸4鎲?wèn)題,TNF-α在血清中極易降解造成測(cè)量值很小。

第二、因?yàn)檠逯幸恍┪镔|(zhì)對(duì)測(cè)量有干擾,造成OD值較低,甚至低于0濃度的OD值,表現(xiàn)為負(fù)值。

第三、實(shí)驗(yàn)溫度造成的,建議嚴(yán)格按照說(shuō)明書要求操作。

      樣本正確保存方法:ELISA實(shí)驗(yàn)血清、血漿樣本正確采集方法:檢測(cè)的樣本,及時(shí)儲(chǔ)存在4℃?zhèn)溆?。?duì)于隔天再檢測(cè)的樣本,及時(shí)分裝后凍存在-20℃?zhèn)溆茫袟l件的,-70℃凍存?zhèn)溆?。?biāo)本應(yīng)避免反復(fù)凍融。

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