ELISA試劑盒使用指南------ 步驟、常見問題、解決方案、實驗準備

 1、 加樣器不確；尤其10ul以下的加樣器，對結(jié)果影響極大；

 2、 保溫設備不良；

3 、洗滌用水不規(guī)范。 (1) 校正加樣器；10ul以下加樣器需采用進口產(chǎn)品（芬蘭、法國等）； (2) 仔細校正溫度到37℃，水浴箱為佳； (3) 必須使用去離子水或蒸餾水，不得用自來水、礦泉水等。

4、 認真閱讀使用說明書。  樣品加樣 (1) 加樣不準確； (2) 沒有混勻。  加樣時一定要仔細。加樣后，再檢查，以防漏加、錯加。加樣后，反復抽吸3次混勻，防止血清聚集孔底，導致非特異性吸附。洗滌  洗滌不*  ,每次注水洗滌，應靜止30秒鐘；選用吸水紙作為襯墊，每次洗滌后扣干孔內(nèi)水分；可選用塑料洗滌瓶。 加酶反應 漏加 滴加后，認真檢查各孔。  

5、結(jié)果判斷  (1) 包括陰性對照孔在內(nèi)，各孔顯色普遍偏深； (2) 包括陽性對照在內(nèi)，各孔均無顯色；  (3) 陽性對照不顯色，而其它樣本顯色正常； (4) 有些標本顯色不深，判斷陽性困難?？赡苁窍礈觳怀浞郑患訕舆^量；溫育時間過長溫度過高；按說明書重新操作。如無改善， 可與生產(chǎn)廠家聯(lián)*； 如果是漏加樣本或酶液；溫育時間過短溫度過低；試劑保存不當活性下降；按說明書重新 操作。如無改善，可與生產(chǎn)廠家聯(lián)*； 陽性對照漏加、錯加或失效。重新操作。如無改善，可與廠家聯(lián)*，索要對照品； 重新操作。使用酶標儀，測定光吸收度，按P/N值標準判斷。  

6、ELISA試劑盒保存 保存不規(guī)范 一定要在2-8℃存放。不得過高，也不得凍存（凍存后，酶液將失效）。  對照品 對照品為凍干品 按對照管標示，加入相應體積的去離子水或蒸餾水復溶，充分溶解混勻?？砂凑f明書使用。