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大腸桿菌內(nèi)毒素(endotoxin)酶聯(lián)免疫試劑盒使用說明書

時(shí)間:2016-12-28閱讀:250
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本試劑盒僅供研究使用。

檢測范圍:                                                          96T

0.03Eu/L – 0.8Eu/L

 

使用目的:

本試劑盒用于測定大腸桿菌樣本中內(nèi)毒素(endotoxin)含量。

實(shí)驗(yàn)原理

本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測定標(biāo)本中大腸桿菌內(nèi)毒素(endotoxin)水平。用純化的大腸桿菌內(nèi)毒素(endotoxin)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入內(nèi)毒素(endotoxin),再與HRP標(biāo)記的內(nèi)毒素(endotoxin)抗體結(jié)合,形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物,經(jīng)過*洗滌后加底物TMB顯色。TMBHRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的內(nèi)毒素(endotoxin)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),通過標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中大腸桿菌內(nèi)毒素(endotoxin)濃度。

試劑盒組成

1

30倍濃縮洗滌液

20ml×1

7

終止液

6ml×1

2

酶標(biāo)試劑

6ml×1

8

標(biāo)準(zhǔn)品(1.6Eu/L

0.5ml×1

3

酶標(biāo)包被板

12孔×8

9

標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液

1.5ml×1

4

樣品稀釋液

6ml×1

10

說明書

1

5

顯色劑A

6ml×1

11

封板膜

2 

6

顯色劑B

6ml×1/

12

密封袋

1個(gè)

計(jì)算

  以標(biāo)準(zhǔn)物的濃度為橫坐標(biāo),OD值為縱坐標(biāo),在坐標(biāo)紙上繪出標(biāo)準(zhǔn)曲線,根據(jù)樣品的OD值由標(biāo)準(zhǔn)曲線查出相應(yīng)的濃度;再乘以稀釋倍數(shù);或用標(biāo)準(zhǔn)物的濃度與OD值計(jì)算出標(biāo)準(zhǔn)曲線的直線回歸方程式,將樣品的OD值代入方程式,計(jì)算出樣品濃度,再乘以稀釋倍數(shù),即為樣品的實(shí)際濃度。

 

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