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小鼠腦脊髓炎病毒自然感染調(diào)查以及人工感染小鼠試驗

時間:2017/5/19閱讀:322
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摘要:了解小鼠腦脊髓炎病毒(TMEV)自然感染情況,探究人工感染TMEV小鼠體內(nèi)各臟器組織中病毒分布及血清抗體變化。

目的 了解小鼠腦脊髓炎病毒(TMEV)自然感染情況,探究人工感染TMEV小鼠體內(nèi)各臟器組織中病毒分布及血清抗體變化。

方法 采用酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA)和熒光定量RT-PCR(qRT-PCR)檢測方法對2010年~2015年廣東地區(qū)采集的SPF級小鼠、開放環(huán)境飼養(yǎng)的小鼠以及野生褐家鼠臨床樣本進(jìn)行TMEV檢測。36只ICR小鼠經(jīng)腦內(nèi)接種TMEV BeAn病毒,每天觀察動物的臨床癥狀,在接種第0、3、7、10、17、21、31、39、46天每個時間點分別對3只動物***,剖檢并取血清和組織臟器樣本進(jìn)行TMEV檢測。

結(jié)果 SPF級小鼠TMEV抗體陽性率為5.29%(n=2834),核酸陽性率為27.27%(n=457);開放環(huán)境飼養(yǎng)的小鼠的抗體和核酸陽性率分別為71.95%(n=82)和53.66%(n=82);野生褐家鼠中核酸陽性率為25.93%(n=27)。TMEV陽性小鼠中僅有兩只小鼠表現(xiàn)有明顯的臨床癥狀。盲腸內(nèi)容物、糞便和腦是qRT-PCR檢測的**選擇樣本。ICR小鼠腦內(nèi)接種TMEV BeAn病毒后第3 d可在腦、心臟、肝臟、肺臟和胃中檢測到病毒核酸,脾臟、腎臟和盲腸中未檢測到病毒核酸。肝臟、心臟、肺臟和胃中的病毒在接種后第10天已*清除,腦中的病毒一直持續(xù)存在到第46天試驗結(jié)束。小鼠感染后第7天可以檢測到抗體,隨后抗體水平逐漸升高,接種后17 d抗體陽性率達(dá)100%,并一直到46 d都可以維持較高的抗體水平。人工感染小鼠呈隱**染,臨床上并未表現(xiàn)明顯癥狀和眼觀病理變化。

結(jié)論 廣東地區(qū)實驗小鼠和野生褐家鼠均存在TMEV感染,且感染率較高。小鼠接種TMEV BeAn毒株后呈隱**染,感染小鼠第7天可以產(chǎn)生抗體且持續(xù)存在。病毒在感染小鼠肝臟、心臟、肺臟和胃中短時間存在,而在腦中長期存在。qRT-PCR與ELISA兩種檢測方法具有較好的一致性,qRT-PCR檢測方法可作為實驗動物國家標(biāo)準(zhǔn)的有力補(bǔ)充。

 

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