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江蘇菲亞生物科技有限公司
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兔血清使用已經(jīng)保存注意事項
2019-3-22 閱讀(1610)
兔血清的使用方法：
1、稱取本品23.5g，加入蒸餾水或去離子水1 L，攪拌加熱煮沸至*溶解，分裝三角瓶，121℃高壓滅菌15min，備用。
2、樣品的稀釋及處理，略。
3、根據(jù)商檢的標(biāo)準要求或?qū)?biāo)本污染情況的估計，兔血清選擇2—3個稀釋度，分別在10倍遞增稀釋的同時，即以吸取該稀釋度的吸管移1mL稀釋液于滅菌平皿內(nèi)，每個稀釋度做兩個平皿。
4、稀釋液移入平皿后，應(yīng)及時將涼至45℃的瓊脂培養(yǎng)基(可放置于45℃水浴箱保溫)注入平皿約15mL，并轉(zhuǎn)動平皿使混合均勻。同時將瓊脂培養(yǎng)基傾入加有1mL稀釋液的滅菌平皿內(nèi)作空白對照。
5、待瓊脂凝固后，翻轉(zhuǎn)平板，置36±1℃溫箱內(nèi)培養(yǎng)48±2h。
6、觀察結(jié)果并進行計數(shù)。25-250個菌落為合適范圍。
兔血清保存注意事項：
1、需要長期保存的兔血清必須儲存于-20℃ - 兔血清-70℃ 低溫冰箱中，4℃冰箱中保存時間切勿超過1月，由于血清結(jié)冰時體積會增加約10%，因此，血清在凍入低溫冰箱，必須預(yù)留定體積空間，否則易發(fā)生污染或玻璃瓶凍裂。
2、瓶裝血清解凍需采用逐步解凍法：-20℃ 至 -70℃ 兔血清低溫冰箱中的血清放入4℃冰箱中溶解1天，然后移入室溫，待全部溶解后再分裝。在溶解過程中需不斷輕輕搖晃均勻(小心勿造成氣泡)，使溫度與兔血清成分均一，減少沉淀的發(fā)生。切勿直接將血清從-20℃進入37℃解凍，因溫度改變太大，容易造成蛋白質(zhì)凝集而出現(xiàn)沉淀。
