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上海研伴實(shí)業(yè)有限公司


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人APP基因轉(zhuǎn)染CHO細(xì)胞株

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產(chǎn)品型號(hào)

品       牌

廠(chǎng)商性質(zhì)生產(chǎn)商

所  在  地上海市

聯(lián)系方式：陳浩查看聯(lián)系方式

更新時(shí)間：2017-10-20 15:53:33瀏覽次數(shù)：278次

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經(jīng)營(yíng)模式：生產(chǎn)廠(chǎng)家

商鋪產(chǎn)品：1400條

所在地區(qū)：上海上海市

聯(lián)系人：陳浩 （銷(xiāo)售）

產(chǎn)品簡(jiǎn)介

人APP基因轉(zhuǎn)染CHO細(xì)胞株
Human App Gene Transfection Cho Cell Lines
貨號(hào)：7WD10
價(jià)格：￥1350.0
規(guī)格： 1*10?6?  
細(xì)胞介紹
采用脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染的方法，穩(wěn)定轉(zhuǎn)染CHO細(xì)胞野生型AβPPTS1 基因，所得細(xì)胞表達(dá)野生型AβPPTS1蛋白

詳細(xì)介紹

人APP基因轉(zhuǎn)染CHO細(xì)胞株

Human App Gene Transfection Cho Cell Lines

貨號(hào)：7WD10

價(jià)格：￥1350.0

規(guī)格： 1*10 6   

細(xì)胞介紹

采用脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染的方法，穩(wěn)定轉(zhuǎn)染CHO細(xì)胞野生型AβPPTS1 基因，所得細(xì)胞表達(dá)野生型AβPPTS1蛋白

人APP基因轉(zhuǎn)染CHO細(xì)胞株細(xì)胞特性
1） 來(lái)源：脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染CHO細(xì)胞

2） 形態(tài)：梭形

3） 含量：>1x106 個(gè)/mL
4） 污染：支原體、細(xì)菌、酵母和真菌檢測(cè)為陰性
5） 規(guī)格：T75瓶或者1mL凍存管包裝
 

運(yùn)輸和保存

使用含有優(yōu)質(zhì)胎牛血清的2ml凍存管發(fā)送存活細(xì)胞。收到細(xì)胞后，可在1000RPM，常溫條件下，離心5min后，于潔凈操作臺(tái)棄去上清，加入*使用的培養(yǎng)基后轉(zhuǎn)移至250px培養(yǎng)皿或者T75培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)，傳代達(dá)到細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí)，再進(jìn)行凍存。具體操作見(jiàn)細(xì)胞培養(yǎng)步驟。

 

細(xì)胞用途

僅供科研使用。

                       
細(xì)胞培養(yǎng)步驟
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1） 準(zhǔn)備DMEM-H培養(yǎng)基(DMEM-H:GIBCO,貨號(hào)12800017, 添加NaHCO3 1.5g/L)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%，添加250ug/ml G418。
2） 培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37攝氏度，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3） 凍存液：90%*培養(yǎng)基，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲(chǔ)存。
二． 細(xì)胞處理：
1） 復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入250px皿中，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)過(guò)夜）。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2） 細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于貼壁細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。
2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3. 按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3）細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。貼壁細(xì)胞凍存時(shí)，棄去培養(yǎng)基后加入少量*，細(xì)胞變圓脫落后，加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中，再添加10%DMSO后進(jìn)行凍存。

 

關(guān)鍵詞：培養(yǎng)箱 顯微鏡

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