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中國標準物質網(wǎng):差毫厘謬千里!移液器的正確使用方法!

時間:2019/10/10閱讀:1502
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  在進行分析測試方面的研究時,一般采用移液槍(pipette)量取少量或微量的液體。對于移液槍的正確使用方法及其一些細節(jié)操作,是很多人都會忽略的?,F(xiàn)在分幾個方面詳細敘述。
 
  量程的調節(jié)
 
  在調節(jié)量程時,用拇指和食指旋轉取液器上部的旋鈕,如果要從大體積調為小體積,則按照正常的調節(jié)方法,逆時針旋轉旋鈕即可;但如果要從小體積調為大體積時,則可先順時針旋轉刻度旋鈕至超過量程的刻度,再回調至設定體積,這樣可以保證量取的較高度。在該過程中,千萬不要將按鈕旋出量程,否則會卡住內部機械裝置而損壞了移液槍。
 
  槍頭的裝配
 
  在將槍頭(pipette tips)套上移液槍時,很多人會使勁地在槍頭盒子上敲幾下,這時錯誤的做法,因為這樣會導致移液槍的內部配件(如彈簧)因敲擊產(chǎn)生的瞬時撞擊力而變得松散,甚至會導致刻度調節(jié)旋鈕卡住。正確的方法是將移液槍(器)垂直插入槍頭中,稍微用力左右微微轉動即可使其緊密結合。如果是多道(如8道或12道)移液槍,則可以將移液槍的道對準個槍頭,然后傾斜地插入,往前后方向搖動即可卡緊。槍頭卡緊的標志是略為超過O型環(huán),并可以看到連接部分形成清晰的密封圈。
 
  移液槍抓握姿勢
 
  移液之前,要保證移液器、槍頭和液體處于相同溫度。吸取液體時,四指并攏握住移液器上部,用拇指按住柱塞桿頂端的按鈕,移液器保持豎直狀態(tài),將槍頭插入液面下2-3毫米,緩慢松開按鈕,吸上液體,并停留1~2秒鐘(粘性大的溶液可加長停留時間),將吸頭沿器壁滑出容器,排液時吸頭接觸傾斜的器壁。在吸液之前,可以先吸放幾次液體以潤濕吸液嘴(尤其是要吸取粘稠或密度與水不同的液體時)。后按下除吸頭推桿,將吸頭推入廢物缸。
 
  兩種移液方法
 
  1、前進移液法
 
  用大拇指將按鈕按下至停點,然后慢慢松開按鈕回原點。接著將按鈕按至停點排出液體,稍停片刻繼續(xù)按按鈕至第二停點吹出殘余的液體。后松開按鈕。
 
  2、反向移液法
 
  此法一般用于轉移高粘液體、生物活性液體、易起泡液體或極微量的液體,其原理就是先吸入多于設置量程的液體,轉移液體的時候不用吹出殘余的液體。先按下按鈕至第二停點,慢慢松開按鈕至原點。接著將按鈕按至停點排出設置好量程的液體,繼續(xù)保持按住按鈕位于停點(千萬別再往下按),取下有殘留液體的槍頭,棄之。
 
  移液器正確放置
 
  使用完畢,可以將其豎直掛在移液槍架上,但要小心別掉下來。當移液器槍頭里有液體時,切勿將移液器水平放置或倒置,以免液體倒流腐蝕活塞彈簧。
 
  移液器使用注意事項
 
  (1)吸取液體時一定要緩慢平穩(wěn)地松開拇指,絕不允許突然松開,以防將溶液吸入過快而沖入取液器內腐蝕柱塞而造成漏氣。
 
  (2)為獲得較高的精度,吸頭需預先吸取一次樣品溶液,然后再正式移液,因為吸取血清蛋白質溶液或有機溶劑時,吸頭內壁會殘留一層“液膜”,造成排液量偏小而產(chǎn)生誤差。
 
  (3)濃度和粘度大的液體,會產(chǎn)生誤差,為消除其誤差的補償量,可由試驗確定,補償量可用調節(jié)旋鈕改變讀數(shù)窗的讀數(shù)來進行設定。
 
  (4)可用分析天平稱量所取純水的重量并進行計算的方法,來校正取液器,1ml蒸餾水20℃時重0.9982g。
 
  (5)移液器反復撞擊吸頭來上緊的方法是非常不可取的,長期操作會使內部零件松散而損壞移液器。
 
  (6)移液器未裝吸頭時,切莫移液。
 
  (7)移液器嚴禁吸取有強揮發(fā)性、強腐蝕性的液體(如濃酸、濃堿、有機物等)。
 
  (8)嚴禁使用移液器吹打混勻液體。
 
  (9)不要用大量程的移液器移取小體積的液體,以免影響準確度。同時,如果需要移取量程范圍以外較大量的液體,請使用移液管進行操作。
 
  (10)如不使用,要把移液槍的量程調至較大值的刻度,使彈簧處于松弛狀態(tài)以保護彈簧。
 
  (11)定期清洗移液槍,可以用肥皂水或60 %的異丙醇,再用蒸餾水清洗,自然晾干。
 
  (12)高溫消毒之前,要確保移液器能適應高溫。
 
  (13)校準是可以在20-25度環(huán)境中,通過重復幾次秤量蒸餾水的方法來進行。
 
  (14)使用時要檢查是否有漏液現(xiàn)象。方法時吸取液體后懸空垂直放置幾秒中,看看液面是否下降。如果漏液,原因大致有一下幾方面:
 
  1、槍頭是否匹配;
 
  2、彈簧活塞是否正常;
 
  3、如果是易揮發(fā)的液體(許多有機溶劑都如此),則可能是飽和蒸汽壓的問題??梢韵任艓状我后w,然后再移液。
 
  購買移液器時應考慮的五大問題
 
  1、在性能和人體工程學方面,新的移液器與其他的區(qū)別是什么?
 
  2、產(chǎn)品是否與其他制造商的槍頭兼容?
 
  3、此產(chǎn)品提供哪些類型的服務?校準?維修?
 
  4、產(chǎn)品購買前后,生產(chǎn)商是否提供應用技術的支持?
 
  5、什么是產(chǎn)品的生命周期是多長?產(chǎn)品的保修期?如果公司停止生產(chǎn)該產(chǎn)品,他們會提供多少年的儀器配件和零件服務?
 
  日常清洗和維護保養(yǎng)
 
  為了確保移液器的準確度和度,應根據(jù)具體使用情況進行定期保養(yǎng)。特別是在使用腐蝕性溶劑后,應該對移液器進行清潔。通過這些簡單的清潔和保養(yǎng)方法,可適當?shù)匮娱L移液器的使用壽命。
 
  1、外部清洗
 
  方法:根據(jù)使用情況,可以用洗潔精清洗,或用60%異丙醇消毒,然后用雙蒸水淋洗,晾干。
 
  2、內部清洗
 
  一般密封圈無需維護,活塞清洗或更換后需要涂上薄薄一層硅酮油脂(移液器每日用完后,應旋轉到大刻度,讓彈簧恢復原形,有助于保持彈簧彈性)。針對不同性質的液體,有不同的清洗和保養(yǎng)方法,見表。
 
  不同性質液體的清洗和保養(yǎng)方法
 
  3、消毒
 
  包括紫外消毒、高壓消毒。若移液器采用抗紫外線的高質量材料做成,可以采用紫外消毒。高壓消毒分為整支移液器高壓滅菌消毒和半支高壓消毒。整支高壓滅菌消毒前需旋松連接部位,進行部分拆卸和半支高壓消毒;下半支可以拆卸,進行高壓消毒(121℃、20min),如有必要,將消毒部件在室溫下晾干,等到溫度*降低后再安裝。

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