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上海邦景實(shí)業(yè)有限公司
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被污染細(xì)胞清除方法及預(yù)防辦法
2022-8-29 閱讀(294)
培養(yǎng)細(xì)胞一經(jīng)污染，多數(shù)較難處理。在細(xì)胞培養(yǎng)中如果污染細(xì)胞價值不大，宜棄之；在尋找原因后*消毒操作室，復(fù)蘇或重新購置細(xì)胞，再進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng)。污染細(xì)胞價值較大，又難于重新得到，可采取以下清除細(xì)胞污染方法：
1、用MRA處理
用MRA（Mycoplasma Removal Agent）處理細(xì)胞，每4天換一次液,連續(xù)處理15天以確保細(xì)胞純潔健康，效果好。
2、藥物輔助加溫處理
細(xì)胞培養(yǎng)先用藥物處理后，再將污染的組織培養(yǎng)物放在41℃培養(yǎng)18小時，可殺死支原體，但對細(xì)胞有影響。
3、 用清洗純化法清除支原體污染的方法
細(xì)胞營養(yǎng)馴化→細(xì)胞群的篩選→細(xì)胞清洗→反復(fù)離心洗滌。
其原理是利用離心力、細(xì)胞、微生物質(zhì)量和懸液的浮力差達(dá)到清除支原體的目的。由于支原體個體小且除發(fā)酵支原體外多為細(xì)胞外寄生,所以通過反復(fù)洗滌細(xì)胞和低速離心換液使其中潛在的支原體數(shù)量降低限。
如結(jié)合敏感抗生素的抑殺作用，可達(dá)到更好的效果。
4、使用支原體特異性血清
用5%的兔支原體免疫血清可去除支原體污染，因特異抗體可抑制支原體生長，故經(jīng)抗血清處理后11天即轉(zhuǎn)為陰性，并且5個月后仍為陰性。
但此法比較麻煩，不如用抗生素方便、經(jīng)濟(jì)。
預(yù)防污染辦法：
1、孵箱應(yīng)定期用三氧機(jī)消毒或者紫外光照射，并用酒精和新潔爾滅試擦孵箱同時孵箱內(nèi)的水應(yīng)是三蒸水；
2、超凈臺\取材\器材\培養(yǎng)液\培養(yǎng)瓶\操作等因素；
3、超凈臺的風(fēng)機(jī)不能過大，風(fēng)機(jī)到6-8格，否則也可能能致霉菌污染；
4、無菌室經(jīng)甲醛熏蒸消毒后，可用同等量的氨水噴灑中和，約幾小時即可進(jìn)入操作。
