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上海邦景實(shí)業(yè)有限公司

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ATCC細(xì)胞

elisa酶聯(lián)免疫試劑盒

菌種

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培養(yǎng)基

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血清

標(biāo)準(zhǔn)品

PCR檢測(cè)試劑盒

ELISA試劑盒

科研抗體

生化檢測(cè)試劑盒

科研細(xì)胞

分子生物學(xué)試劑

PCR熒光定量檢測(cè)試劑盒

檢測(cè)試劑盒

PCR相關(guān)試劑

細(xì)胞培養(yǎng)

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elisa酶聯(lián)免疫試劑盒實(shí)驗(yàn)材料及保存方法

2021-4-21  閱讀(1759)

elisa酶聯(lián)免疫試劑盒實(shí)驗(yàn)材料與試劑配制:

1. 儀器與材料:酶標(biāo)儀(使用前預(yù)熱30分鐘),微量加液器、吸頭、蒸餾水或去離子水,濾紙。

2. 緩沖液使用:加5ul 的緩沖液于50ul 的樣品中,如果樣品量不夠或者不確定,緩沖液和樣品的混合比例不要小于1:10即可。
混勻,靜置1小時(shí)備用(如果標(biāo)本是血清或者血漿,此步驟忽略)。

3. 洗液的配制:按1:100的比例配制洗液備用。

elisa酶聯(lián)免疫試劑盒樣品收集、處理及保存

1. 細(xì)胞培養(yǎng)上清:適用于檢測(cè)體外培養(yǎng)的細(xì)胞分泌性成份。用無(wú)菌管收集細(xì)胞上清液,以1000×g離心15分鐘,收集上清。

2. 細(xì)胞:用PBS反復(fù)洗滌細(xì)胞3次,調(diào)整細(xì)胞濃度達(dá)到104
-106/ml 左右,通過反復(fù)凍融,使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份,或者細(xì)胞超聲粉碎,離心取上清液檢測(cè)。

3. 血清:在室溫下,血液自然凝固,以1000×g離心15分鐘,取上清待測(cè)。

4. 血漿:應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA 或檸檬酸鈉作為抗凝劑,混合后靜置10-20 分鐘后,以1000×g離心15分鐘,收集上
清。

5. 體液:包括胸腹水、腦脊液,分泌物等。使用不含熱原和內(nèi)毒素的離心管收集,以1000×g離心15分鐘,收集上清。

6. 組織標(biāo)本:切取組織標(biāo)本,稱取重量0.5mg,加入500ul 的PBS,用手工或勻漿器,或超聲破碎儀將標(biāo)本勻漿,以2000-3000
rmp離心20 分鐘,收集上清進(jìn)行檢測(cè)。

7. 樣品中不能含有NaN3,因NaN3 抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。

8. 保存:如果樣品不能立即檢測(cè),應(yīng)將其分裝,-70 ℃保存,避免反復(fù)冷凍。保存過程中如出現(xiàn)沉淀,應(yīng)再次離心。血液標(biāo)
本盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中含大量顆粒,檢測(cè)前先離心或過濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應(yīng)在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。



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