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上海邦景實(shí)業(yè)有限公司
主營(yíng)產(chǎn)品： 進(jìn)口elisa試劑盒，細(xì)胞株，細(xì)胞系，菌種 |
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- www.bhsy-e.com/
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- 品牌 其他品牌
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- 所在地 上海市
更新時(shí)間：2022-12-25 09:26:12瀏覽次數(shù)：224
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商品屬性：
產(chǎn)品名稱：人舌鱗癌細(xì)胞：CAL 27
貨號(hào)：BJ-X96583
規(guī)格：1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶
分類：細(xì)胞系
商品介紹：
名稱 CAL 27 (人舌鱗癌細(xì)胞) 種屬 人類 年齡（性別） 男性，56歲 組織來(lái)源 舌 生長(zhǎng)特性 貼壁細(xì)胞 細(xì)胞形態(tài) 上皮細(xì)胞樣 背景描述 CAL 27細(xì)胞是由J·Gioanni于1982年建系，源自一位56歲白人男性的舌頭中倍的病變部位；CAL 27細(xì)胞角蛋白強(qiáng)陽(yáng)性。 生物安全等級(jí) 1 生長(zhǎng)培養(yǎng)基 DMEM＋10% FBS＋1% P/S 推薦傳代比例 1:3-1:4 推薦換液頻率 2~3次/周 倍增時(shí)間 ~20-45小時(shí) 凍存條件 凍存液：55% 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+40%FBS+5%DMSO 溫度：液氮 培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5% 溫度：37℃ 致瘤性 Yes, solid tumors developed within 6 weeks in nude mice inoculated with 2×10^6 cells subcutaneously. 保藏機(jī)構(gòu) ATCC; CRL-2095 DSMZ; ACC-446 |
細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號(hào)21875-091)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲(chǔ)存。
二．細(xì)胞處理：產(chǎn)品僅用于科研
1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細(xì)胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
Sodium Butyrate(HDAC 抑制劑 )1g 96 孔板病毒 DNAout( 真空法 )1次
Sodium orthovanadate( 0酸酯酶抑制劑 )2g 96 孔板病毒 DNAout( 離心法 )5次
SP600125(JNK 抑制劑 )5mg 96 孔板病毒 DNAout( 離心法 )1次
Spermidine.trihvdrochloride(nNOS 抑制劑 )1g 96 孔板 PCR 片段純化回收試劑盒 ( 真空法 )1次
Staurosporine(PKC 抑制劑 )0.1mg 96 孔板 PCR 片段純化回收試劑盒 ( 離心法 )5次
辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記的鼠抗人IgG單克隆抗體
辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記的兔抗雞IgM
辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記的小鼠抗牛IgG
辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記的兔抗牛IgM
辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記的兔抗小鼠k鏈
人舌鱗癌細(xì)胞：CAL 27大鼠泛素連接酶(E3/UBPL)elisa檢測(cè)試劑盒
大鼠泛素連接酶(E3/UBPL)elisa檢測(cè)試劑盒免費(fèi)代測(cè)
大鼠泛素羧基端酯酶L1(UCHL1)elisa檢測(cè)試劑盒
大鼠芳烴受體核轉(zhuǎn)位因子樣蛋白1(ARNTL)elisa分析檢測(cè)試劑盒
大鼠芳烴受體核轉(zhuǎn)位因子樣蛋白1(ARNTL)elisa檢測(cè)試劑盒
操作要點(diǎn)：
1）將培養(yǎng)基在37℃水浴鍋預(yù)熱；準(zhǔn)備一個(gè)15mL無(wú)菌的離心管，加入8mL預(yù)熱培養(yǎng)基。
2）將凍存細(xì)胞從液氮罐中取出，快速放入37℃水浴鍋中復(fù)溫（可準(zhǔn)備一潔凈的燒杯，裝滿37℃的水，細(xì)胞凍存管取出后迅速放入燒杯內(nèi)，再逐步轉(zhuǎn)移到水浴鍋中）。輕輕晃動(dòng)凍存管，使細(xì)胞能在1~2min內(nèi)*解凍，使細(xì)胞能盡快通過(guò)最易受損的溫度段（-5~0℃）。注意凍存管管口不能沒(méi)入水中，BRL(大鼠肝細(xì)胞)避免引起污染。
3）用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺(tái)內(nèi)，將管內(nèi)細(xì)胞轉(zhuǎn)移至準(zhǔn)備好的離心管內(nèi)，輕輕吹打液體，使細(xì)胞均勻分散，降低DMSO濃度，吹打時(shí)避免產(chǎn)生氣泡。用新鮮培養(yǎng)基洗管壁2次，均轉(zhuǎn)移至離心管內(nèi)。
4）800rpm離心5min，棄上清，加入新鮮的培養(yǎng)基，吹打制成細(xì)胞懸液。
5）將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移至T25細(xì)胞瓶?jī)?nèi)，補(bǔ)加適量的培養(yǎng)基，輕輕晃動(dòng)細(xì)胞瓶使細(xì)胞分布均勻，放入溫箱內(nèi)培養(yǎng)。
6）第二天觀察細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)情況，換新鮮培養(yǎng)基以去除死細(xì)胞。繼續(xù)培養(yǎng)，待細(xì)胞長(zhǎng)至80~90%匯合時(shí)正常傳代。一般剛復(fù)蘇的細(xì)胞需經(jīng)過(guò)2~3次傳代，細(xì)胞活力恢復(fù)后才能進(jìn)行后續(xù)的實(shí)驗(yàn)。
