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上海邦景實業(yè)有限公司
主營產品： 進口elisa試劑盒，細胞株，細胞系，菌種 |
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- www.bhsy-e.com/
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- 品牌 其他品牌
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更新時間：2022-06-15 15:59:21瀏覽次數：380
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生物醫(yī)學實驗中，常常需要從液體樣品(如血漿，培養(yǎng)基)中純化病毒，但由于病毒顆粒十分細小，傳統(tǒng)的分離方法是使用長時間超速離心才能將其從液體樣品中分離出來，此操作非常繁瑣，并且病毒在此過程中容易變性。為了克服傳統(tǒng)方法的缺點，本公司開發(fā)了本產品。
中文名稱：SDS-PAGE濃縮膠緩沖液(4×)
英文名稱：SDS-PAGE Stacking Gel Buffer(4×)
產品規(guī)格：200ml
發(fā)貨周期：1～3天
產品貨號：BJ-F0164892
產品介紹：
?本產品為配制SDS-PAGE濃縮膠緩沖液，可用于配制各種濃度的變性及非變性PAGE凝膠，方便、快捷。產品中已加入10%SDS,使用時不用另外加入。 操作步驟： 根據目的蛋白分子量大小選擇合適的PAGE分離膠配制濃度，佳膠濃度請參考附表1。 I 灌制分離膠(各試劑使用量請參考附表2) 1、參照凝膠模具說明書，裝配好凝膠模具。 注：加入上層篩板有助于加樣時保持填料與樣品均勻接觸，是否加入上層篩板可根據實際情況選擇。 2、將不同體積的30%Acr-Bis(29:1)、分離膠緩沖液和純水在小燒杯或試管中混合。 3、加入10%APS和TEMED，輕輕攪拌使其混勻，避免產生氣泡。 4、在凝膠模具中灌入適量分離膠溶液(對于mini-gel，凝膠液加至約距前玻璃板頂端1.5 cm或距梳齒約0.5 cm即可)， 然后在分離膠溶液上輕輕覆蓋一層1 cm的水層，使凝膠表面保持平整。 5、靜置30-60分鐘，待分離膠和水層之間出現一個清晰的界面后，表面凝膠已聚合。 II 灌制濃縮膠(各試劑使用量請參考附表3) 1、去除覆蓋在分離膠上的水層。 2、將不同體積的30%Acr-Bis(29:1)、SDS-PAGE Stacking Gel Buffer(4×)濃縮膠緩沖液和純水在一個小燒杯或試管中混合。 3、加入10%過硫酸銨和TEMED，輕輕攪拌使其混勻，避免產生氣泡。 4、將濃縮膠溶液加至分離膠的上面，直至凝膠溶液到達前玻璃板的頂端。 5、將梳子插入凝膠內，避免產生氣泡。 6、靜置10~20分鐘，等待濃縮膠聚合。 7、待凝膠聚合后，小心地拔出梳子，以免破壞加樣孔。 8、進行常規(guī)電泳操作。 儲存條件：2～8℃ |
使用方法：本產品僅用于科研
注意：標本采集人員需按有關規(guī)定做好個人防護。咽、鼻拭子最好在發(fā)病的3天采集。
在安全柜內將本產品分裝到自備的、螺旋蓋內有橡膠圈的5mL旋蓋塑料管里(一級容器)。
鼻拭子的采集：將棉簽輕輕插入鼻道內鼻腭處，停留片刻后緩慢轉動退出。以同一拭子拭兩側鼻孔。將棉簽浸入上步得到的、裝有3mL本產品的旋蓋離心管中，棄去拭子尾部，擰緊螺旋蓋。
咽拭子的采集：用棉簽擦拭雙側咽扁桃體及咽后壁，將棉簽浸入第一步得到的、裝有3mL本產品的旋蓋離心管中，棄去拭子尾部，擰緊螺旋蓋。
直接在一級容器上用油性記號筆寫明樣本的種類、采樣時間、編號、患者姓名。
將密閉后的標本放入大小適合的塑料袋內密封；每袋裝一份標本。同時也將標本有關信息填在標本送檢表上，連同一級容器封于塑料袋內。
將裝標本的密封袋放入自備的帶螺旋蓋內有橡膠圈的塑料容器(二級容器)內，擰緊蓋，在容器上標明有關信息。同一患者2份以上的密封標本，可以放在同一個二級容器內。二級容器要承受不少于95 KPa的壓力，內襯具吸水和緩沖能力的物質。所有容器必須印有生物危險標注。
將二級容器擺放在專用運輸箱內(或疫苗運輸箱)，放入冰排，然后以柔軟物質填充，并密封，由專人(2人)運送，不得郵寄，最好使用專車。
采集的標本若不能在24小時內送達，則應盡快在-70℃以下保存。無-70℃條件的，需在4℃冰箱短時間暫存，并盡快聯系遞送標本。流感病毒在-20℃～-40℃時不穩(wěn)定，故長期保存最好在-70℃溫度以下進行。
注意事項：
①加入試劑的順序應一致，以保證所有反應板孔溫育的時間一樣。
②使用干凈的塑料容器配置洗滌液。
③按照說明書中標明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。
④底物A應揮發(fā)，避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感，避免長時間暴露于光下。避免用手接觸，有毒。實驗完成后應立即讀取OD值。
⑤洗滌酶標板時應充分拍干，不要將吸水紙直接放入酶標反應孔中吸水。
⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染，吸取終止液和底物A、B液時，避免使用帶金屬部分的加樣器。
⑦實驗中不用的板條應立即放回包裝袋中，密封保存，以免變質。
⑧試劑應按標簽說明書儲存，使用前恢復到室溫。稀稀過后的標準品應丟棄，不可保存。
⑨不用的其它試劑應包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質前使用。
全組織免疫熒光顯微鏡*間接檢測試劑盒（含一抗和熒光二抗）
全組織免疫熒光顯微鏡直接檢測試劑盒(含熒光一抗)
活體細胞半胱-1（CASPASE-1）活性原位熒光染色檢測試劑盒
冰凍切片半胱-1（CASPASE-1）活性原位熒光染色檢測試劑盒
活體細胞半胱-2（CASPASE-2）活性原位熒光染色檢測試劑盒
小鼠纖溶抑制因子/激活的纖溶抑制物(TAFI)elisa ，英文名： TAFI ELISA Kit
小鼠抗核膜糖蛋白210抗體(gp210)ELISA檢測試劑盒MouseAi-glucoprotein210,GP210ELISAKit 96T/48T
人橫紋肌輔肌動蛋白α(sm Actinin-α )免疫試劑盒 Human sm Actinin-α ELISA Kit
RatCXC-chemokineligand16,CXCL16ELISAKit大鼠CXC趨化因子配體16(CXCL16)elisa規(guī)格：96T/48T
3’端銜接體(LINKER)連接試劑盒20次
MouseCyclosporineA,CsAelisa小鼠A(CsA)elisa規(guī)格：96T/48T
SDS-PAGE濃縮膠緩沖液(4×)小鼠醌NADH脫氫酶1(NQO1)elisa檢測試劑盒
小鼠跨膜蛋白酶2(TMPRSS2)elisa檢測試劑盒
小鼠跨膜蛋白97(TMEM97/MAC30)elisa檢測試劑盒
小鼠跨膜蛋白97(TMEM97/MAC30)elisa分析檢測試劑盒
小鼠跨膜蛋白27(TMEM27)elisa檢測試劑盒
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細胞100μL/孔，通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞，細胞毒性實驗每孔加入100微升5000～10000個細胞（具體每孔所用的細胞的數目，需根據細胞的大小，細胞增殖速度的快慢等決定）。置37℃ 5%CO2細胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時.
2、.加入適當濃度的0～10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃，含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養(yǎng)箱中孵育適當時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液，在37℃孵育4小時，使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解，用平板搖床搖勻。
7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度（如無570nm 濾光片，可以使用560-600nm 的濾光片）。
8、結果分析
a、細胞的存活率：將各測試孔的OD 值減去本底OD 值（*培養(yǎng)基加MTT，無細胞）或空白藥物孔OD 值（*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT，無細胞），各重復孔的OD 值取平均數±SD。細胞的存活率以T/C%表示，T 為加藥細胞的OD 值，C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =（加藥細胞OD/對照細胞OD）×100
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)。
