想要試驗(yàn)成果自然少不了ELISA試劑盒操作條件，我司業(yè)務(wù)錢司理整理了一份關(guān)于ELISA試劑盒操作條件，快來(lái)看看吧。
ELISA試劑盒操作過(guò)程
ELISA試劑盒運(yùn)用前，將所有試劑充沛混勻。不要使液體發(fā)作大量的泡沫，以免加樣時(shí)參與大量的氣泡，發(fā)作加樣上的過(guò)失。依據(jù)待測(cè)樣品數(shù)量加上標(biāo)準(zhǔn)品的數(shù)量決議所需的板條數(shù)。每個(gè)標(biāo)準(zhǔn)品和空白孔主張做復(fù)孔。每個(gè)樣品依據(jù)自己的數(shù)量來(lái)定，能運(yùn)用復(fù)孔的盡量做復(fù)孔。標(biāo)本用標(biāo)本稀釋液1：1稀釋后參與50ul于反應(yīng)孔內(nèi)。
參與稀釋好后的標(biāo)準(zhǔn)品50ul于反應(yīng)孔、參與待測(cè)樣品50ul于反應(yīng)孔內(nèi)。立即參與50ul的*符號(hào)的抗體。蓋上膜板，悄悄振蕩混勻，37℃溫育1小時(shí)。
甩去孔內(nèi)液體，每孔加滿洗刷液，振蕩30秒，甩去洗刷液，用吸水紙拍干。重復(fù)此操作3次。假如用洗板機(jī)洗刷，洗刷次數(shù)添加一次。
每孔參與80ul的親和鏈酶素-HRP，悄悄振蕩混勻，37℃溫育30分鐘。
甩去孔內(nèi)液體，每孔加滿洗刷液，振蕩30秒，甩去洗刷液，用吸水紙拍干。ELISA試劑盒重復(fù)此操作3次。假如用洗板機(jī)洗刷，洗刷次數(shù)添加一次。
每孔參與底物A、B各50ul，悄悄振蕩混勻，37℃溫育10分鐘。防止光照。
取出酶標(biāo)板，敏捷參與50ul停止液，參與停止液后應(yīng)立即測(cè)定成果。
在450nm波利益測(cè)定各孔的OD值。
依據(jù)ELISA試劑盒試劑的來(lái)歷和標(biāo)本的性狀以及檢測(cè)的具備條件，可規(guī)劃出各種不同類型的檢測(cè)方法。
（一）雙抗體夾心法
（二）雙位點(diǎn)一步法
（三）間接法測(cè)抗體
（四）競(jìng)爭(zhēng)法
（五）捕獲法測(cè)IgM抗體
（六）使用親和素和*
ELISA試劑盒廣泛用作非放射性同位素的成鍵化驗(yàn). 在這種方法中, 一般標(biāo)準(zhǔn)配體是固定的, 經(jīng)過(guò)參與溶液相受體或蛋白質(zhì)來(lái)使之成鍵. ELISA試劑盒經(jīng)過(guò)參與與受體特異性反應(yīng)的抗體來(lái)定量成鍵的受體, 而且*初抗體的量以參與第二種能顯色的抗體丈量. 第二種抗體能識(shí)別抗體的結(jié)尾, 在其結(jié)尾的堿性磷酸酯或過(guò)氧化物酶等與酶發(fā)作反應(yīng), 從而使溶液顯色.
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