ELISA試劑盒是一種敏感性高，特異性強(qiáng)，重復(fù)性好的實(shí)驗(yàn)確診方法。雖然ELISA試劑盒的操作進(jìn)程看似簡略，但沒做到位的話就會(huì)影響實(shí)驗(yàn)的作用。
所以ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)時(shí)至關(guān)重要的進(jìn)程有：
一，、重要的洗刷：
不充分的洗刷會(huì)導(dǎo)致差異和高布景，然后帶來不抱負(fù)的實(shí)驗(yàn)效果。假設(shè)未結(jié)合的資料殘留在微孔板中，那么它會(huì)增加布景噪音。有必要的話，可增加洗刷液中的鹽濃度，這會(huì)阻止非特異結(jié)合反應(yīng)。假設(shè)布景過高，置疑洗刷不夠時(shí)，能夠檢驗(yàn)增加洗刷次數(shù)。
第二、要害的關(guān)閉：
關(guān)閉液的作用是讓不相關(guān)的蛋白占有微孔板中潛在的結(jié)合位點(diǎn)。這就下降了可發(fā)生信號(hào)的抗體非特異結(jié)合的時(shí)機(jī)。假設(shè)布景過高，置疑關(guān)閉不充分，那么能夠檢驗(yàn)運(yùn)用更高濃度的關(guān)閉液，或恰當(dāng)延伸關(guān)閉時(shí)刻。
現(xiàn)在主要有兩種類型的關(guān)閉液：蛋白和非離子型去污劑。運(yùn)用的類型須取決于多個(gè)要素，包含微孔板的表面試劑、吸附的抗原、抗體和檢測(cè)試劑。好的關(guān)閉液應(yīng)下降非特異性結(jié)合，但它不應(yīng)當(dāng)與抗原、抗體或檢測(cè)試劑發(fā)生相互作用。
第三、抗體濃度須優(yōu)化：
假設(shè)試劑稍有不同，則或許需要優(yōu)化抗體的量。非特異的抗體結(jié)合會(huì)增加布景。為了防止這一點(diǎn)，切勿運(yùn)用過多的一抗或二抗。
第四、檢測(cè)試劑要適量：
切勿運(yùn)用過多的檢測(cè)試劑。假設(shè)濃度過高，或者未正確稀釋，則會(huì)導(dǎo)致高布景。也不要顯色過度，如有必要，優(yōu)化一下何時(shí)應(yīng)參與停止液。
只要保證每一步操作都做到位，才會(huì)呈現(xiàn)的實(shí)驗(yàn)效果。所以ELISA實(shí)驗(yàn)的每一步都很重要，不能夠漫不經(jīng)心。
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