當(dāng)即測(cè)驗(yàn)其吸光度值，等過幾分鐘再測(cè)驗(yàn)吸光度值，發(fā)現(xiàn)兩次測(cè)得的吸光度值發(fā)生衰減。第2次均小于*次。近日的李老師在操作ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)的時(shí)分發(fā)現(xiàn)了一個(gè)問題，于是來電我公司的售后部分問道：加完顯色液(購買)顯色一定時(shí)刻后，再加停止液（2M H2SO4，自己制造）后，而且，加停止液時(shí)，從*條加到第12條后，測(cè)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，吸光度值從1-12條逐級(jí)衰減。條件是這12條酶標(biāo)板都是同一種產(chǎn)品，而且包被相同蛋白。
通過我公司技術(shù)專員的剖析，本來ELISA吸光度值衰減能夠這樣奇妙應(yīng)對(duì)。
其實(shí)具體的原因也很簡(jiǎn)單，有可能是顯色液的質(zhì)量不夠好。一般情況下，停止反響后OD值的下降前期不是很明顯。停止后，吸光度值是會(huì)跟著時(shí)刻衰減，所以一般是加完停止液后當(dāng)即測(cè)，這樣比較準(zhǔn)。再次剖析12條顯示逐級(jí)遞減的原因看看是否是：
① 顯色時(shí)刻調(diào)整，如果你現(xiàn)在的顯色時(shí)刻是10MIN，那調(diào)整到30MIN，再加停止液,觀察上述現(xiàn)象是否出現(xiàn)。
② 停止液中加入少量甘油看下怎么樣。建議您使用RD品牌的ELISA試劑盒，顯色時(shí)刻是30分鐘，停止后要求在30分鐘內(nèi)檢測(cè)，加入停止液后，在加入停止液后2到3分終內(nèi)檢測(cè)，這是OD值相對(duì)比較高。擬合值能到達(dá)四個(gè)9。
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