ELISA試劑盒進(jìn)行洗刷作業(yè)時(shí)，首要采用以下兩種方法。
流水沖刷式：用于小珠載體的洗刷，洗刷液僅為蒸餾水甚至可用自來(lái)水。洗刷時(shí)附接一特別設(shè)備，使小珠在流水沖擊下不斷地滾動(dòng)淋洗，持續(xù)沖刷2分鐘后，吸干液體，再用蒸餾水浸泡2分鐘，吸干即可。浸泡式猶如盆浴，流水沖刷式則比如淋浴，其洗刷作用更為*，且也簡(jiǎn)潔、快速。已有實(shí)驗(yàn)表明，流水沖刷式相同也適用于微量滴定板的洗刷。洗刷時(shí)設(shè)法加大水流量或加大水壓，讓水流沖擊板孔表面，洗刷作用更佳。
浸泡式：吸干或甩干孔內(nèi)反應(yīng)液；
用洗刷液過(guò)洗一遍(將洗刷液注滿板孔后，即甩去)；
浸泡，行將洗刷液注滿板孔，放置1-2分鐘，間歇搖動(dòng)，浸泡時(shí)間不可隨意縮短；
吸干孔內(nèi)液體。吸干應(yīng)*，可用水泵或真空泵抽吸，也可甩去液體后在清潔毛巾或吸水紙上拍干；
洗刷3-4次，或按說(shuō)明規(guī)矩。在間接法中如本底較高，可增加洗刷次數(shù)或延長(zhǎng)浸泡時(shí)間。
ELISA試劑盒的設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品的標(biāo)準(zhǔn)濃度規(guī)劃要有一個(gè)比較大的跨度，而且要能包括你所要檢測(cè)實(shí)驗(yàn)樣品的濃度，即樣品的濃度要在標(biāo)準(zhǔn)曲線濃度規(guī)劃之內(nèi)，包括上限和下限，而關(guān)于呈S型的標(biāo)準(zhǔn)曲線，盡量要使實(shí)驗(yàn)樣品的濃度在中間斜度及陡段，即曲線簡(jiǎn)直成直線的規(guī)劃內(nèi)。
用倍比稀釋法制造標(biāo)準(zhǔn)曲線中的標(biāo)準(zhǔn)樣品濃度，這樣就可以確保標(biāo)準(zhǔn)樣品的濃度不會(huì)出現(xiàn)較大的偏離。
樣品的濃度等方針是依據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算出來(lái)的，所以要把做標(biāo)準(zhǔn)曲線看作是比做正式實(shí)驗(yàn)還要重要的一件事，不然后邊的實(shí)驗(yàn)效果無(wú)從談起。
做出的標(biāo)準(zhǔn)曲線相關(guān)系數(shù)因?qū)嶒?yàn)要求不同而有所改變，但一般來(lái)說(shuō)，相關(guān)系數(shù)R至少要大于0.98，關(guān)于有些實(shí)驗(yàn)，至少要0.99甚至是0.999。
檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)樣品時(shí)，應(yīng)按濃度遞加順序進(jìn)行，以減少高濃度對(duì)低濃度的影響，提高準(zhǔn)確性。
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