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技術(shù)文章

常用三大ELISA實驗方法優(yōu)勢劣勢

閱讀:678發(fā)布時間:2019-10-29

總所周知,ELISA試劑盒法可分為多種類型測定,是一種廣泛應(yīng)用在測定液體樣本中的蛋白、抗體、或激素的免疫剖析技能。今天,我司技能專員為您解析ELISA試驗三大常用辦法的優(yōu)勢與下風,一起跟著通蔚小編來看看吧!
一、直接法
將抗原直接固定在固相載體上,參與酶符號的一級抗體,即可測定抗原總量,此一級抗體的特異性非常重要。
優(yōu)勢:操作手續(xù)簡略,因無須運用二抗可防止交互反響。
下風:試驗中的一抗都得用酶符號,但不是每種抗體都適合做符號,費用相對進步。
二、ELISA試劑盒間接法
此測定辦法與直接法類似,不同在于一級抗體沒有酶符號,改用酶符號的二級抗體去辨識一級抗體來測定抗原量。
優(yōu)勢:二抗能夠加強信號,ELISA試劑盒并且有多種選擇能做不一樣的測定剖析。不加酶符號的一級抗體則能保存它多的免疫反響性。
下風:交互反響發(fā)生的機率較高。
三、雙抗體夾心法
被查看的抗原包被在兩個抗體之間,其間一個抗體將抗原固定于固相載體上,即捕捉抗體。另一個則是查看抗體,此抗體可用酶符號后直接測定抗原的量;或不符號,再透過酶符號的二級抗體來測定抗原的量。這兩種抗體有必要留心選擇,才可防止交互反響或競賽一樣的抗原結(jié)合部位。
優(yōu)勢:高活絡(luò)、高專一性,抗原無須事前純化。
下風:抗原必定得具有兩個以上的抗體結(jié)合部位。
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