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技術(shù)文章

人堿性磷酸酶ELISA試劑盒 樣本處理及要求

閱讀:261發(fā)布時(shí)間:2020-2-13

人堿性磷酸酶(ALP)ELISA試劑盒 樣本處理及要求:

1. 血清:室溫血液自然凝固10-20分鐘,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。細(xì)心搜集上清,保存過(guò)程中如呈現(xiàn)沉積,應(yīng)再次離心。

2. 血漿:應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA或檸檬酸鈉作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。細(xì)心搜集上清,保存過(guò)程中如有沉積構(gòu)成,應(yīng)該再次離心。

3. 尿液:用無(wú)菌管搜集,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。細(xì)心搜集上清,保存過(guò)程中如有沉積構(gòu)成,應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照實(shí)行。

4.細(xì)胞培養(yǎng)上清:檢測(cè)排泄性的成份時(shí),用無(wú)菌管搜集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。細(xì)心搜集上清。檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)的成份時(shí),用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細(xì)胞懸液,細(xì)胞濃度達(dá)到100萬(wàn)/ml左右。

通過(guò)重復(fù)凍融,以使細(xì)胞損壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。細(xì)心搜集上清。保存過(guò)程中如有沉積構(gòu)成,應(yīng)再次離心。

5.組織標(biāo)本:切開標(biāo)本后,稱取分量。參加一定量的PBS,PH7.4。用液氮敏捷冷凍保存?zhèn)溆?。?biāo)本消融后仍然保持2-8℃的溫度。

參加一定量的PBS(PH7.4),用手藝或勻漿器將標(biāo)本勻漿充分。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。細(xì)心搜集上清。分裝后一份待檢測(cè),其余冷凍備用。

6. 標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取,提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行,提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。若不能立刻進(jìn)行試驗(yàn),可將標(biāo)本放于-20℃保存,但應(yīng)避免重復(fù)凍融.

7. 不能檢測(cè)含NaN3的樣品,因NaN3按捺辣根過(guò)氧化物酶的(HRP)活性。


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