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技術(shù)文章

今日課堂:揭秘我司elisa試劑盒操作重點

閱讀:228發(fā)布時間:2020-4-21

時間過得真快,您是否也在期待著馬上過五一呢呢?小編也和您一樣,每天都要多看幾眼日歷,仿佛這樣時間過得好像快點是的。我司為了讓您愉快的心情更加愉悅點,特地揭秘我司elisa試劑盒的操作重點。

一、讓競爭ELISA方法起到*作用

ELISA試劑盒的英文名稱是ELISA KIT,它是繼免疫熒光和放射免疫技術(shù)之后發(fā)展起來的一種免疫酶技術(shù)。此項技術(shù)自70年代初問世以來,發(fā)展十分迅速,目前已被廣泛用于生物學(xué)和醫(yī)學(xué)科學(xué)的許多領(lǐng)域。

可以利用競爭ELISA方法,在酶標(biāo)板微孔上預(yù)包被抗 *抗原。檢測時,加入標(biāo)準(zhǔn)品或樣品溶液,*抗體及酶標(biāo)記物,包被抗原和加入樣本中的*競爭性地與*抗體結(jié)合后,再與酶標(biāo)記物形成抗原抗體復(fù)合物,用TMB底物顯色;加入反應(yīng)終止液,在450nm波長酶標(biāo)儀下進行檢測,樣品中的*濃度與吸收光強度成反比。

二、冬季ELISA實驗也要做保溫

1. 為何要保溫?

因為ELISA屬固相免疫測定,抗原、抗體的結(jié)合只在固相表面上發(fā)生。這是一個逐步平衡的過程,因此需經(jīng)擴散才能達到反應(yīng)的終點。

2. 保溫的方式有哪些咧?

除有的ELISA儀器附有特制的電熱塊外,一般均采用水?。?/p>

① 可將ELISA試板置于水浴箱中,ELISA板底應(yīng)貼著水面,使溫度迅速平衡。

② 為避免蒸發(fā),板上應(yīng)加蓋,也可用塑料貼封紙或保鮮膜覆蓋板孔,此時可讓反應(yīng)板漂浮在水面上。

③ 若用保溫箱,應(yīng)放在濕盒內(nèi),濕盒要選用傳熱性良好的材料如金屬等,在盒底墊濕的紗布,zui后將ELISA板放在濕紗布上。

④ 濕盒應(yīng)先放在保溫箱中預(yù)溫至規(guī)定的溫度,特別是在氣溫較低的時候更應(yīng)如此。

⑤ 無論是水浴還是濕盒溫育,反應(yīng)板均不宜疊放,以保證各板的溫度都能迅速平衡。

⑥ 室溫溫育的反應(yīng),操作時的室溫應(yīng)嚴(yán)格限制在規(guī)定的范圍內(nèi),標(biāo)準(zhǔn)室溫溫度是指20~25℃,但具體操作時可根據(jù)說明書的要求控制溫育。

⑦ 室溫溫育時,只要平置于操作臺上即可。

⑧ 應(yīng)注意溫育的溫度和時間應(yīng)按規(guī)定力求準(zhǔn)確。

⑨ 為保證這一點,一個人操作時,一次不宜多于兩塊板同時測定。

第三、實驗中的回溫平衡

在加樣之前約半小時左右,把試劑盒從冰箱中取出,放置在室溫下進行平衡,平衡到用手握住試劑瓶感覺到不涼為止。如果時間匆忙的話也可以利用手握住試劑瓶進行快速回溫。

以上就是今天的全部內(nèi)容了,這些elisa試劑盒的操作重點您get到了嗎?


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