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技術(shù)文章

論述冷凍后的試劑盒處理方式

閱讀:335發(fā)布時間:2020-7-30

 我們知道,完整的elisa試劑盒包含:

① 酶的底物;

② 已包被抗原或抗體的固相載體(免疫吸附劑);

 酶標記的抗原或抗體(結(jié)合物);

④ 結(jié)合物及標本的稀釋液;

⑤ 洗滌液,在板式ELISA中,常用的稀釋液為含0.05%吐溫20磷酸緩沖鹽水;

⑥ 陰性對照品和陽性對照品(定性測定中),參考標準品和控制血清(定量測定中);

⑦ 酶反應(yīng)終止液,常用的HRP反應(yīng)終止液為硫酸,ELISA試劑盒其濃度按加量及比色液的zui終體積而異,在板式ELISA中一般采用2mol/L。

那么被冷凍后的試劑盒質(zhì)量會受損嗎?通蔚為您解答!

1、為其保存后可以使用,但不能反復凍融,如果您在一周之內(nèi)做實驗,可以2-8℃保存;如果您在一周至一個月之內(nèi)做實驗,可以-20℃保存如果您在一個月以上做實驗,可以-80℃保存。但是值得注意的是凍融一次比2-8℃保存損失的更大損失主要是蛋白的降解,凍融一次蛋白都有降解。

2、在建立ELISA方法作反應(yīng)動力學研究時,實驗表明,兩次抗原抗體反應(yīng)一般在37℃經(jīng)1~2小時,產(chǎn)物的天生可達。溫育常采用的溫度有43℃、37℃、室溫順4℃等。室溫溫育時要平置于操縱臺上即可。37℃是實驗室中常用的保溫溫度,也是大多數(shù)抗原抗體結(jié)合的合適溫度。

3、保溫的方式除有的ELISA儀器附有特制的電熱塊外,一般均采用水浴,可將ELISA板置于水浴箱中,ELISA板底應(yīng)貼著水面,使溫度迅速平衡。操縱時的室溫應(yīng)嚴格限制在劃定的范圍內(nèi),尺度室溫溫度是指20~25℃,但詳細操縱時可根據(jù)仿單的要求控制溫育。

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