用于染色細(xì)胞的樣品方案

以下程序適用于大多數(shù)細(xì)胞類型。 生長培養(yǎng)基，細(xì)胞密度，其他細(xì)胞類型的存在和其他因素可能影響B(tài)rdu摻入。

1）制備1-10mM DMSO儲備溶液。 如果儲存在-20°C，DMSO儲備液可以保存6個月。

2）通過離心沉淀細(xì)胞并將細(xì)胞重懸于生長培養(yǎng)基中。 培養(yǎng)物中的貼壁細(xì)胞可以在蓋玻片上或細(xì)胞培養(yǎng)孔中原位染色。

3）使用5和20μM之間的濃度添加Brdu染色并孵育60分鐘過夜作為指導(dǎo)。 孵育時間取決于細(xì)胞類型和實(shí)驗(yàn)?zāi)繕?biāo)。

4）用70-80％酒精或酸 - 乙醇固定細(xì)胞20-30分鐘。

5）用PBS洗滌（3次，每次2分鐘）。

6）繼續(xù)進(jìn)行免疫細(xì)胞化學(xué)染色技術(shù)。