分光光度計和酶標(biāo)儀都是光檢測儀器，實驗室中主要用來測定實驗樣本的吸光度，雖然它們的功用基本相同，但是兩者還是有很大差別的。

其主要差異主要有以下幾點：

一、檢測波長范圍的不同

分光光度計雖與酶標(biāo)儀一樣都使用朗伯-比耳定律進(jìn)行吸光度測定，但它們的可測光在波長范圍上是有所區(qū)別。分光光度計主要分為三種：

紫外分光光度計：主要測定波長范圍為200-380nm的紫外光區(qū).

可見光分光光度計（或比色計）:主要測量波長范圍為380~780 nm的可見光區(qū)。 

熒光分光光度計：主要用于液體、凝膠類的光譜掃描。激發(fā)波長掃描范圍一般是190~650nm，發(fā)射波長掃描范圍是200~800nm。可用于液體、固體樣品（如凝膠條）的光譜掃描。 

紅外分光光度計或原子吸收分光光度計適合用于測定2.5～25μm（按波數(shù)計為4000cm<-1>～400cm<-1>）的紅外光區(qū)。

普通的酶標(biāo)儀主要通過濾光片來激發(fā)光源形成特定的波長.在濾光片輪中使用不同的濾光片可獲得不同長度的波長,但波長范圍相對較窄。另外酶標(biāo)儀具有較強(qiáng)紫外吸收能力，所以在300nm以下波長光區(qū)不建議使用酶標(biāo)儀進(jìn)行含量測定。

二、檢測效率不同

 酶標(biāo)儀即酶聯(lián)免疫檢測儀是采用48孔或96孔酶標(biāo)板即微孔板作為樣本容器，可以盛裝不同的樣本以同時測定吸光度，并能快速地進(jìn)行吸光度對比。而分光光度計采用的是盛樣器皿為比色皿，每次只能測定一種溶液樣本，這樣增加了實驗的重復(fù)性，同樣也增加了樣本及試劑的使用量，測定效率也遠(yuǎn)遠(yuǎn)低于酶標(biāo)儀。

三、 光路的方向的不同

由于根據(jù)測定樣本方式的不同，兩者的光路設(shè)計也不相同。分光光度計采用的水平光路設(shè)計，也就是光線水平通過樣本和比色皿，其測定結(jié)果不會受到垂直方向因素影響。酶標(biāo)儀所采用的是垂直光路設(shè)計，這樣光線可以一次通過所有待測孔。但它的缺點在于容易受到樣本溶液液面平整度、待測樣本濃度、微孔板的通透性能等因素影響而造成實驗數(shù)據(jù)偏差。

四、光路的長度的不同：

 由于樣本的吸光系數(shù)與樣本濃度、光路長度及OD值成正比例關(guān)系。所以光路的長度也會影響到吸光率。在分光光度計中，由于其光路是水平的，光路長度近似于比色皿的寬度，一般為1厘米左右。而酶標(biāo)儀的光路長度則取決于樣本溶液的液面高度，這就要保證每個孔內(nèi)的液面高度要一致，如果樣本液面的高度參差不齊，也會直接影響實驗結(jié)果的準(zhǔn)確度。

由此可見，吸光度的測定需要根據(jù)不同的實驗內(nèi)容去選擇對應(yīng)的儀器設(shè)備，有效地?fù)P長避短，這樣才能較大程度發(fā)揮儀器的功用，從而提高實驗效率和準(zhǔn)確的實驗結(jié)果。

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