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用非選擇性培養(yǎng)基對(duì)牛乳、土壤、水和食品等含有混合微生物的樣品進(jìn)行計(jì)數(shù)時(shí), 常需要估算平板上生長(zhǎng)的不同種類的微生物的相對(duì)數(shù)量。然后就可以計(jì)算出存在于原始樣品中各種微生物的分布百分比。若不加控制地從培養(yǎng)皿中挑選菌落不能獲得代表 性的菌落,現(xiàn)已有多種方法可獲得真正隨機(jī)的菌落。在這些操作中,應(yīng)該注意到那些可 能會(huì)被*忽視但卻十分重要的菌體組成.例如,在107的假單胞菌中有107的氣單胞菌,即在平均100個(gè)被檢菌落中僅僅會(huì)發(fā)現(xiàn)一個(gè)氣單胞菌菌落。特定的菌落的選擇 方法取決于所需檢測(cè)的菌落數(shù)和存在于分離平板上的菌落數(shù)目。常用的選擇方法 如下:
方法1
選擇平板上的每一個(gè)菌落。這個(gè)方法獲得的數(shù)量與被檢菌落數(shù)目大致相等。
方法2
選擇扇形區(qū)段和相對(duì)扇形區(qū)的每一個(gè)菌落。幾種劃分扇區(qū)的方法:
1.用油性記號(hào)筆在平板的表面劃分扇區(qū)(如分四個(gè)區(qū)>。
2.將平板放在哈里遜板上,標(biāo)記適當(dāng)?shù)纳葏^(qū)或菌落。哈里遜在研究奶酪中的細(xì)菌數(shù)和細(xì)菌類型時(shí)設(shè)計(jì)了哈里遜板。它能夠很方便地從少量供試的菌落中 獲得有代表性的菌落
將要檢測(cè)的培養(yǎng)皿同心地放在板上。首先選擇標(biāo)記有1的區(qū)域中的所有菌落進(jìn)行檢測(cè)。如果得不到足夠的數(shù)目,選擇標(biāo)記有“2”的區(qū)域的所有菌落。如果有必要可以繼續(xù) 選擇“3”、“4”區(qū)域中的菌落,直到達(dá)到所需的菌落數(shù)。一旦開(kāi)始對(duì)標(biāo)記了序號(hào)的扇區(qū)開(kāi)始計(jì)數(shù),必須把這些扇區(qū)全部記完。所有在標(biāo)記線上的菌落可忽略不記。
方法3:復(fù)制平板
如果平板表面已接種,可以用復(fù)制工具轉(zhuǎn)移所有的菌落。zui簡(jiǎn)單的復(fù)制工具是無(wú)菌棉絨墊。它是在一個(gè)直徑比平皿略小的合適的圓柱體(如合金圓柱體)一端的平面上平放一張火菌的棉絨墊(高壓后快速臧少壓力以保 證平絨墊的干燥)而制成。將其輕輕壓在培養(yǎng)基表面,壓住菌落,取出后連續(xù)輕輕壓在幾個(gè)準(zhǔn)備好的滅菌的適當(dāng)培養(yǎng)基上,zui后壓在對(duì)照培養(yǎng)基上檢查轉(zhuǎn)移是否成功。通常需要 轉(zhuǎn)移9個(gè)平板加1個(gè)對(duì)照。釆用這種方法可以問(wèn)時(shí)檢測(cè)每一個(gè)菌落的多種生理特性。如 果要重新使用用過(guò)的平絨布,應(yīng)將其放到一個(gè)裝水的容器中。高II消毒,清除污染,再經(jīng)洗滌、漂洗、干燥、梳理后迸行高壓滅菌。
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