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*(也被拼寫*)是一種蝕刻玻璃室提出雙方將舉行石英蓋玻片*室地板0.1毫米以上。為9毫米2的總表面積的計數(shù)室中進行蝕刻。
圖1、 *的尺寸。
濃度的計算是根據(jù)上下方的蓋玻片的體積。一個大廣場(參見圖2中的W)擁有量為0.0001毫升(長x寬x高,也就是說,0.1厘米×0.1厘米×0.01厘米)。
在這兩種方法中,通過毛細管作用填充* - 放置填充的吸移管具有良好的懸吊在*的邊緣的凹口的細胞混合,然后慢慢地排出一些內容,以便通過毛細作用進入腔室fluidis繪制。
染色的細胞往往有利于可視化和計數(shù)。無論是混合細胞用臺盼藍(trypan blue)等體積的[0.4%(重量/體積)tyrypan藍色在PBS]來確定活/死計數(shù)(死細胞是藍色的),或殺死??細胞,用10%福爾馬林,然后染色用臺盼藍(trypan blue)或其他染色(以提高所有單元格的可視化。
這里有兩個簡單的方法,用于計數(shù)的基礎上用于確定細胞計數(shù)的*的表面面積的細胞。其他的計數(shù)計劃accetable的的。方法的選擇取決于細胞濃度 - 該程序的準確性取決于計數(shù)細胞的數(shù)目。當細胞濃度低,應該算更多的網(wǎng)格。
方法A
計數(shù)的細胞數(shù)量在4個外廣場(參見圖2左側面板)。
將細胞濃度計算如下:
細胞濃度每毫升細胞總數(shù)在4平方×2500×稀釋因子
實施例:如果一個計數(shù)稀釋后的細胞懸浮液的等分試樣1時一十450細胞,原始細胞濃度= 450×2500×10 = 11,250,000 /毫升
方法B的
估計細胞濃度計數(shù)在大廣場中間5格(參見圖2右側面板中)。
將細胞濃度計算如下:
細胞濃度每毫升細胞總數(shù)在5平方×50 000×稀釋因子
實施例:如果一個數(shù)45細胞,稀釋后的細胞懸浮液的等分試樣1點10,原始細胞濃度= 45×50 000×10 = 22 500 000 /毫升
圖2、 計算方法程序A(左圖)和B(右圖)。
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