聚丙烯酰胺凝膠電泳 可用于蛋白和寡核苷酸的分離，zui常用于蛋白質(zhì)的分離，這里總結(jié)了DNA電泳的各種濃度PAGE膠配制的配方及制備方法。

聚丙烯酰胺 凝膠電泳簡(jiǎn)稱為PAGE（Polyacrylamide gel electrophoresis），是以聚丙烯酰胺凝膠作為支持介質(zhì)。聚丙烯酰胺凝膠是由單體的丙烯酰胺（CH2=CHCONH2 Acrylamide）和甲叉雙丙烯酰胺（CH2(NHCOHC=CH2) 2 N,N'-methylenebisacrylamide）聚合而成，這一聚合過(guò)程需要有自由基催化完成。

各種濃度PAGE膠的配制(DNA電泳用)

50ml體系：

5ml體系：

1、丙烯酰胺30%為29：1(質(zhì)量比，丙烯酰胺：雙甲叉丙烯酰胺)

2、TEMED 可以加到1ul/ml。

不同濃度丙烯酰胺和DNA的有效分離范圍表

*表中給出的數(shù)字為與指示劑遷移率相等的雙鏈DNA分子 所含堿基對(duì)數(shù)目(bp).

凝膠的制備過(guò)程：

1、 按要求裝配好垂直電泳板，兩塊玻璃板的兩側(cè)及底部用1%的瓊脂糖封邊，防止封閉不嚴(yán)而使聚丙烯酰胺液漏出。

2、 將裝好的玻璃電泳板傾斜成45～60℃角。

3、 按表3配制所需%濃度凝膠的毫升數(shù)。

4、 加入TEMED后，立即混勻，緩緩倒入兩玻璃板間的膠床中，直到液體接近溢出時(shí)為止。

5、 立即插入適當(dāng)?shù)氖嶙樱芮凶⒁夥乐故猃X下產(chǎn)生氣泡，用一有力的夾將梳子夾在一邊的玻璃板上，然后將玻璃板斜靠在物體上，使成10°角，可減少液體泄漏的機(jī)會(huì)。

6、 室溫聚合一小時(shí)后，將玻璃板插入電泳槽中，上緊，倒入0.1XTBE緩沖液。

7、 小心取出梳子，加樣。

大家可以根據(jù)自己試驗(yàn)中DNA片段大小的不同選擇配制合適濃度的丙烯酰胺膠。PAGE膠配制過(guò)程中記得避免氣泡的產(chǎn)生。