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本試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本中大鼠膀胱腫瘤抗原（BTA）水平。用純化的大鼠膀胱腫瘤抗原（BTA）抗體包被微孔板，制成固相抗體，往包被單抗的微孔中依次加入膀胱腫瘤抗原（BTA），再與HRP標記的膀胱腫瘤抗原（BTA）抗體結合，形成抗體-抗原-酶標抗體復合物，經(jīng)過*洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉化成藍色，并在酸的作用下轉化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的膀胱腫瘤抗原（BTA）呈正相關。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度（OD值），通過標準曲線計算樣品中大鼠膀胱腫瘤抗原（BTA）濃度。
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