高等生物是由多細胞構成的整體,在整體條件下要研究單個細胞或某一群細胞在體內(nèi)(in vivo)的功能活動是十分困難的。但是如果把活細胞拿到體外(in vitro)培養(yǎng)進行觀察和研究,則要方便得多。活細胞離體后要在一定的生理條件下才能存活和進行生理活動,特別是高等動植物細胞要求的生存條件極其嚴格,稍有不適就要死亡。所以細胞培養(yǎng)技術(cell culture)就是選用*生存條件對活細胞進行培養(yǎng)和研究的技術。
動物細胞的生存環(huán)境與植物細胞差別很大,因而二者的培養(yǎng)方法很不相同。
(一)動物細胞培養(yǎng)
細胞培養(yǎng)方式大致可分為兩種(圖2-25):一種是群體培養(yǎng)(mass culture),將含有一定數(shù)量細胞的懸液置于培養(yǎng)瓶中,讓細胞貼壁生長,匯合(confluence)后形成均勻的單細胞層;另一種是克隆培養(yǎng)(clonal culture),將高度稀釋的游離細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中,各個細胞貼壁后,彼此距離較遠,經(jīng)過生長增殖每一個細胞形成一個細胞集落,稱為克?。╟lone)。一個細胞克隆中的所有細胞均來源于同一個祖先細胞。此外,為了制取細胞產(chǎn)品而設計了轉鼓培養(yǎng)法,使用大容量的圓培養(yǎng)瓶,在培養(yǎng)過程中不斷地轉動,使培養(yǎng)的細胞始終處于懸浮狀態(tài)之中而不貼壁。
細胞培養(yǎng)[cell culture]
圖2-25 群體培養(yǎng)(左)和克隆培養(yǎng)(右)
表2-3 目前實驗室中常用的幾種細胞系
細胞系名稱
細胞類型
來源
3T3
成纖維細胞
小鼠
HeLa
宮頸癌上皮細胞
人
BHK21
成纖維細胞
敘利亞倉鼠
PtKl
上皮細胞
袋鼠
L6
成肌細胞
大鼠
PCI2
嗜鉻細胞
大鼠
SP2
漿細胞
小鼠
SP2/0
骨髓瘤漿細胞
小鼠
CHO
卵巢細胞
中國地鼠